有機(jī)錫化合物和煙堿類殺蟲劑對(duì)牙鲆魚鰓細(xì)胞株（系）的毒性效應(yīng)與機(jī)理研究.pdf

1、研究生學(xué)位論文有機(jī)錫化合物和煙堿類殺蟲劑對(duì)牙鲆魚鰓細(xì)胞株(系)的毒性效應(yīng)與機(jī)理研究研讎名宿疊指導(dǎo)別嗽E名垂蕉越m_m％蠼Ⅶ輯#蠢灌塞盞堂杖州n月墊墮生最岫抒RM墊墮生且中國(guó)海洋大學(xué)②在探討煙堿類殺蟲劑的致毒機(jī)理時(shí)，首先用分光光度法檢測(cè)了暴露于濃度為6099／mL毗蟲啉和啶蟲瞇環(huán)境下的FG細(xì)胞和非暴露組FG細(xì)胞的SOD，GSHPx及ATPase，除啶蟲瞇暴露組的SOD酶活性在2小表現(xiàn)為上升外。其他受檢測(cè)酶從檢測(cè)所取的第一時(shí)間2小時(shí)開(kāi)始，就

2、處于較低水平，雖有波動(dòng)，但均未達(dá)到對(duì)照組的FG細(xì)胞所檢測(cè)的酶活性水平。其中ATPase受影響最嚴(yán)重，當(dāng)60tag／mL吡蟲啉作用2小時(shí)，ATPase活性較對(duì)照組的酶活性的抑制率高達(dá)60％。在體外毒性檢測(cè)的細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)中觀察到：線粒體是受損害最明顯的細(xì)胞器。這一現(xiàn)象提示我們線粒體是其主要的作用靶位。對(duì)吡蟲啉和啶蟲瞇暴露組的FG細(xì)胞進(jìn)行DNA的提取和檢測(cè)。發(fā)現(xiàn)在毗蟲啉60pg／mL作用2小時(shí)的FG細(xì)胞的DNA檢測(cè)中，出現(xiàn)明顯的“DNAlad

3、der”現(xiàn)象。因此，提示煙堿類殺蟲劑除直接作用于AChE受體外，還可以引起細(xì)胞的凋亡。這是首次發(fā)現(xiàn)毗蟲啉可以引起細(xì)胞凋亡的發(fā)生。但在啶蟲瞇暴露組提取的DNA進(jìn)行電泳檢測(cè)時(shí)，卻沒(méi)有觀察到降解DNA所形成的“梯形”帶。以上對(duì)毒性作用機(jī)理的研究可以說(shuō)明；SOD、GSHPx和ATPase對(duì)保護(hù)細(xì)胞免受氧化還原作用的傷害起著至關(guān)重要的作用。當(dāng)SOD、GSHPx和ATPase的活性降低時(shí)，其對(duì)細(xì)胞抗氧化還原的保護(hù)作用降低，導(dǎo)致線粒體內(nèi)活性氧(Rea

4、ctiveOxygenSpecies，ROS)升高，使線粒體的DNA受損，而線粒體自身的損害又是導(dǎo)致細(xì)胞凋亡的直接原因。因而引起細(xì)胞調(diào)亡。綜上所述，海水魚細(xì)胞系FG對(duì)有機(jī)錫化合物和煙堿類殺蟲劑的反應(yīng)是敏感的，且測(cè)試方法具有快速、簡(jiǎn)便和靈活等優(yōu)點(diǎn)。因此，F(xiàn)G是一個(gè)理想的體外毒性分析系統(tǒng)。同時(shí)，通過(guò)檢測(cè)海水魚細(xì)胞系FG在毒物作用下抗氧化防御系統(tǒng)和ATPase等各種酶活性變化，以及它們對(duì)FG細(xì)胞DNA的損傷情況，可以較準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)該化合物的毒性