新煙堿類殺蟲劑脅迫下中、意蜂行為和生理響應(yīng)的比較研究.pdf

1、新煙堿類殺蟲劑是目前全球范圍內(nèi)應(yīng)用最廣泛的一類農(nóng)藥，它們的大量使用對(duì)害蟲有很好的防治作用，但對(duì)不屬于靶標(biāo)類的授粉昆蟲也產(chǎn)生了一定危害。我國是農(nóng)業(yè)大國，蜜蜂作為最主要的授粉昆蟲在農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展中起著至關(guān)重要的作用。本文通過研究新煙堿類殺蟲劑（吡蟲啉和噻蟲胺）對(duì)我國飼養(yǎng)的兩個(gè)主要蜂種——中華蜜蜂（中蜂，Apis cerana cerana）和意大利蜜蜂（意蜂，Apis mellifera L.）的行為、免疫基因表達(dá)量和主要解毒酶活性的影響，分

2、別評(píng)估了這兩種新煙堿類殺蟲劑對(duì)中、意蜂健康的危害。通過比較分析，進(jìn)一步探究中、意蜂對(duì)新煙堿類殺蟲劑免疫機(jī)制和解毒機(jī)制的差異性。
　　首先通過測(cè)定吡蟲啉和噻蟲胺對(duì)中、意蜂24 h內(nèi)口試LD50，評(píng)估新煙堿類殺蟲劑對(duì)蜜蜂的急性致死毒性。吡蟲啉對(duì)意蜂24 h內(nèi)口試LD50為8.6 ng/只、中蜂1.9 ng/只，噻蟲胺對(duì)意蜂24 h內(nèi)口試LD50為2.0 ng/只，中蜂0.6 ng/只。中蜂相比于意蜂對(duì)新煙堿類殺蟲劑更敏感。通過蔗糖反應(yīng)

3、行為實(shí)驗(yàn)和聯(lián)想性學(xué)習(xí)行為實(shí)驗(yàn)，分析殺蟲劑對(duì)蜜蜂伸吻學(xué)習(xí)記憶能力的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，新煙堿類殺蟲劑對(duì)中蜂學(xué)習(xí)記憶能力的影響更大。學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)中，經(jīng)過吡蟲啉處理的意蜂從第四次訓(xùn)練開始，對(duì)照組與處理組伸吻反應(yīng)率差異逐漸縮小，但經(jīng)過處理的中蜂沒有觀察到明顯的恢復(fù)趨勢(shì)。
　　通過測(cè)定蜜蜂體內(nèi)抗菌肽等免疫基因的表達(dá)量，經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析得出，新煙堿類殺蟲劑能夠引起蜜蜂相關(guān)免疫基因表達(dá)量的上調(diào)，但上調(diào)趨勢(shì)有所差異。Eater基因在中蜂經(jīng)過吡蟲啉經(jīng)過處理后

4、2 h，相對(duì)表達(dá)量達(dá)到峰值，而意蜂在經(jīng)過處理后24 h達(dá)到峰值。Defensin族基因在經(jīng)過處理后的中蜂體內(nèi)表達(dá)量受到明顯抑制，但在意蜂體內(nèi)表達(dá)量明顯上調(diào)。
　　通過新煙堿類殺蟲劑對(duì)兩種蜜蜂解毒酶比活力的檢測(cè)，然后對(duì)蜜蜂不同組織部位解毒酶的比活力進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示，意蜂和中蜂解毒酶的比活力沒有明顯差異，但新煙堿類殺蟲劑能夠引起蜜蜂體內(nèi)多酚氧化酶、羧酸酯酶、谷胱甘肽-s-轉(zhuǎn)移酶三種解毒酶的比活力升高，同時(shí)抑制蜜蜂腦部乙酰膽堿酯酶