長鏈非編碼RNA NONHSAT070806在膀胱癌中的表達水平及功能研究.pdf

1、背景:膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見的腫瘤，在其發(fā)生發(fā)展過程中，腫瘤侵襲起著重要的作用，根據(jù)腫瘤侵襲程度的不同，膀胱癌又被分為非肌層浸潤型膀胱癌(non-muscle invasive bladder cancer，NMIBC)及肌層浸潤型(muscle invasive bladdercancer，MIBC)，其中，MIBC惡性程度高，復發(fā)率高，預后較差，死亡率明顯高于NMIBC。近年來，雖然相關(guān)診療手段有了較大提高，但臨床確診膀胱癌仍然依靠

2、有創(chuàng)性的膀胱鏡檢，這對早起篩查膀胱癌造成了不利影響，因此，深入探討研究膀胱癌病因?qū)W相關(guān)機制，具有重要的臨床意義。長鏈非編碼RNA(Long-noncodingRNA，LncRNA)是一類長度超過200個nt，但沒有編碼蛋白質(zhì)的一類RNA，占人體RNA總數(shù)的80％以上，LncRNA與腫瘤的相關(guān)研究是近年來的熱點，包括多種LncRNA被認為在胃癌、前列腺癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌等惡性腫瘤中表達水平發(fā)生顯著改變，但缺乏相關(guān)機制研究。
　

3、　方法:通過基因芯片對膀胱癌及癌旁組織差異表達的LncRNA進行分析，選取其中表達差異顯著的LncRNA，利用實時定量PCR技術(shù)(qPCR)進一步篩選，接著在34例患者中進行驗證，在此基礎(chǔ)上對LncRNA表達水平與膀胱癌患者臨床指標進行關(guān)聯(lián)性分析。構(gòu)建過表達NONHSAT070806載體，將其瞬時轉(zhuǎn)染入膀胱癌細胞T24和5637中，檢測細胞過表達NONHSAT070806后凋亡、增殖、侵襲、遷移和克隆形成能力的變化，探討NONHSAT0

4、70806在體外對膀胱癌細胞生物學特性的影響。更進一步，將轉(zhuǎn)染NONSHAT070806過表達載體和對照空白載體的5637細胞注射入裸鼠皮下，構(gòu)建裸鼠成瘤模型，通過測量瘤體體積和重量，分析NONHSAT070806對膀胱癌細胞體內(nèi)成瘤能力的影響。
　　結(jié)果:發(fā)現(xiàn)正義鏈長鏈非編碼RNA NONHSAT070806在大部分患者膀胱癌組織中表達水平下降(24/34，70.6％)，且其表達水平與患者腫瘤侵襲程度呈負相關(guān)(p＜0.05)，而

5、與其他臨床指標，如年齡、性別、吸煙史無統(tǒng)計學相關(guān)性。細胞功能學實驗結(jié)果表明，NONHSAT070806過表達后，可誘導細胞凋亡，抑制細胞增殖、遷移、侵襲和細胞克隆形成能力(p＜0.05)，動物實驗結(jié)果同樣表明，NONHSAT070806過表達可以在體內(nèi)抑制膀胱癌細胞威瘤能力(p＜0.05)。
　　結(jié)論:NONHSAT070806在膀胱癌中低表達，且其表達水平與腫瘤侵襲有關(guān)，其可能通過抑制膀胱癌侵襲發(fā)揮其抑癌作用，下一步關(guān)于其作用靶