潰結(jié)靈對UC大鼠Th17細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)機(jī)制研究.pdf

1、本文研究了潰結(jié)靈對UC大鼠Th17細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)機(jī)制。本研究分為三個部分：
　　第一部分：潰結(jié)靈對UC大鼠結(jié)腸黏膜中TGF-β1、IL-6、IL-21、RORγt、STAT3、IL-17mRNA的影響。
　　目的：通過觀察潰結(jié)靈對UC大鼠模型結(jié)腸黏膜TGF-β1、IL-6、IL-21、RORγt、STAT3、IL-17mRNA的影響，并探討相關(guān)作用機(jī)制。
　　方法:采用SD雄性大鼠并制作由三硝基苯磺酸TNBS誘導(dǎo)的UC

2、模型，隨機(jī)分為UC模型組，正常組，SASP組，潰結(jié)靈高、中、低劑組。潰結(jié)靈高、中、低劑量和SASP對UC大鼠進(jìn)行干預(yù)，藥物治療結(jié)束后處死，刮取黏膜，采用實(shí)時定量熒光PCR方法檢測結(jié)腸黏膜中TGF-β1、IL-6、IL-21、STAT3、RORγt、IL-17mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果：潰結(jié)靈高劑組和SASP組結(jié)腸黏膜中TGF-β1mRNA的表達(dá)明顯高于模型組(P＜0.05);模型組結(jié)腸黏膜中IL-6mRNA明顯高于正常組(P＜0.

3、01)，潰結(jié)靈高、中劑組和SASP組的基因表達(dá)低于模型組(P＜0.01);模型組結(jié)腸黏膜中IL-21mRNA明顯高于正常組(P＜0.01)，潰結(jié)靈高、中劑組和SASP組的基因表達(dá)低于模型組(P＜0.01或P＜0.05);模型組結(jié)腸黏膜中STAT3mRNA明顯高于正常組(P＜0.01)，潰結(jié)靈高、中劑組和SASP組的基因表達(dá)低于模型組(P＜0.01或P＜0.05);模型組結(jié)腸黏膜中RORγt明顯高于正常組(P＜0.01)，潰結(jié)靈高、中劑組

4、和SASP組的基因表達(dá)低于模型組(P＜0.01);模型組結(jié)腸黏膜中IL-17mRNA明顯高于正常組(P＜0.01)，潰結(jié)靈高、中劑組和SASP組的基因表達(dá)低于模型組（P＜0.01或P＜0.05）;
　　第二部分：潰結(jié)靈對UC大鼠結(jié)腸黏膜中RORγt、STAT3蛋白表達(dá)的影響。
　　目的：STAT3可調(diào)節(jié)RORγt的表達(dá)，進(jìn)而抑制Th17細(xì)胞的分化，RORγt的表達(dá)亦隨之降低。STAT3為胞質(zhì)著色，主要表達(dá)于黏膜固有層的單個核

5、細(xì)胞，中性粒細(xì)胞和黏膜上皮細(xì)胞中也可見表達(dá)，RORγt主要表達(dá)于炎癥細(xì)胞胞核和胞漿中。本實(shí)驗(yàn)通過采用免疫組化的方法對其蛋白進(jìn)行定位和定量分析。
　　方法：造模、分組、給藥，同實(shí)驗(yàn)一，采用中性福爾馬林固定結(jié)腸組織，制作病理切片，采用免疫組化的方法觀察各組大鼠結(jié)腸中RORγt、STAT3蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：模型組結(jié)腸黏膜中RORγt蛋白表達(dá)高于正常組(P＜0.01)，潰結(jié)靈高、中、低劑組和SASP組的蛋白表達(dá)低于模型組(P＜

6、0.01或P＜0.05);模型組結(jié)腸黏膜中STAT3蛋白表達(dá)高于正常組(P＜0.01)，潰結(jié)靈高、中、低劑組和SASP組的蛋白表達(dá)低于模型組（P＜0.01或P＜0.05）。
　　第三部分：潰結(jié)靈對UC大鼠結(jié)腸黏膜中IL-21蛋白表達(dá)的影響。
　　目的：Th17細(xì)胞大量表達(dá)IL-21，實(shí)驗(yàn)表明IL-21能顯著促進(jìn)Th17細(xì)胞分化，IL-21能取代IL-6的作用和TGF-β1誘導(dǎo)Th17細(xì)胞分化。本實(shí)驗(yàn)通過潰結(jié)靈對UC大鼠結(jié)腸黏

7、膜中IL-21蛋白表達(dá)的影響，并探討其相關(guān)作用機(jī)制。
　　方法：造模、分組、給藥，取材同實(shí)驗(yàn)一，采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)試劑盒檢測結(jié)腸黏膜中IL-21的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：模型組結(jié)腸黏膜中IL-21的蛋白表達(dá)明顯高于正常組(P＜0.05)，潰結(jié)靈高、中劑組和SASP組的蛋白表達(dá)低于模型組(P＜0.05)。
　　結(jié)論：針對研究結(jié)果進(jìn)行分析，可得:UC模型大鼠中，炎癥因子IL-6、IL-21等炎癥因子大量表達(dá)，激活