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文檔簡介
1、目的: 葉酸受體在一些腫瘤細胞膜上呈高水平表達,但在正常組織上不表達或低水平表達。據(jù)此制備葉酸偶聯(lián)白蛋白納米粒(folate conjugated bovine serum album nanoparticles,folate-B SANP,F(xiàn)-BSANP),并觀察其對人肺腺癌A549細胞的靶向效果。 方法: 1、經(jīng)卜乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亞胺鹽酸鹽活化的葉酸與牛血清白蛋白反應(yīng)生成葉酸-白蛋白;
2、去除未反應(yīng)的葉酸;凍干后,測葉酸和白 蛋白的偶聯(lián)率;與鈣黃綠素反應(yīng)制備F-BSANP,真空干燥,電鏡觀察 拍照。計算納米顆粒的直徑。 2、牛血清白蛋白與鈣黃綠素反應(yīng)制備白蛋白納米粒(BSANP) 3、將A549細胞預(yù)培養(yǎng)于培養(yǎng)皿上,分為A、B、C三紺。向各組分別加入BSANP,F(xiàn)olate-BSANP,F(xiàn)olate-BSANP和葉酸,3h后熒光顯微鏡觀察 并攝片。 結(jié)果 1、測得偶聯(lián)
3、率為16.05%,即100 mg BSA上偶聯(lián)16.05mg葉酸。 2、測得白蛋白納米粒冉徑為13.75nm~43.75nm,測得葉酸偶聯(lián)白蛋白納米粒直徑為18.33nm~58.33nm。 3、B組細胞可見強熒光。A組和C組細胞幾乎無熒光。 結(jié)論 制成的Folate-BSA,偶聯(lián)率為16.05%,制成Folate-BSANP后,粒徑為18.33nm~58.33nm。靶向性實驗結(jié)果顯示,F(xiàn)olate-B
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