納米技術(shù)固定化纖維素酶的研究.pdf

1、纖維素酶是一組具有纖維素降解能力酶的總稱,它們協(xié)同作用分解纖維素。游離纖維素酶生產(chǎn)成本高,酶活力相對較低,并且容易失活。固定化纖維素酶穩(wěn)定性高,方便回收利用,可以有效降低應(yīng)用成本。微乳化方法是制備納米顆粒的有效手段,通過選取合適油水相和表面活性劑,可以形成油包水型微乳液,水相液滴作為固定化酶納米顆粒生長的反應(yīng)室,通過控制微乳液的液滴粒徑從而制備出合適大小的固定化酶納米顆粒。
　　 本文探索了兩種微乳法固定纖維素酶的方法,其中微乳

2、凍融法以PVA/γ-Fe2O3體系為固定化酶顆粒的骨架,加入纖維素酶后形成的混合溶液作為水相,以硅油為油相,用油包水微乳化方法,通過微乳分散形成的固定化反應(yīng)室,進而通過反復凍融的方法對纖維素酶進行固定。實驗證明不同比例的PVA和γ-Fe2O3會影響固定化顆粒中的粒徑大小和表面電荷。當PVA和γ-Fe2O3的質(zhì)量比為50時,固定化酶顆粒的粒徑最小。采用表面活性劑span80、物理凍融一次的體系可以獲得較佳效果,其酶活力殘留率達到83.9％

3、。制備的固定化酶顆粒性良好、粒形完整、粒徑在300nm左右。與游離纖維素酶相比,微乳凍融法獲得的固定化酶對于機械剪切作用有很強的耐受能力,并具有良好的協(xié)同作用。在微乳凍融法的基礎(chǔ)上,本實驗進一步探索微乳戊二醛交聯(lián)法對固定化酶的影響。同樣以γ-Fe2O3-PVA-纖維素酶混合液作為水相,以硅油為油相,用戊二醛作為PVA的交聯(lián)劑,采用油酸-油酸鈉復合表面活性劑,油包水微乳化方法制備固定化酶顆粒。制備出的固定化酶的酶活力殘留率有46.3％。顆