高溫厭氧菌產(chǎn)纖維素酶的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本文主要研究了Clostridium thermocopriae sp.nov.JT3-3和Clostridium thermocopriae sp.nov.JT1二種菌分解纖維素的機(jī)制,各種不同碳源及小分子糖對(duì)菌體生長(zhǎng)過(guò)程中各種酶活力及代謝產(chǎn)物的影響.結(jié)果表明:菌體分解纖維素的機(jī)制可以分為吸附、挖空、水解三個(gè)階段.JT1菌分解纖維素的能力高于JT3-3.從代謝產(chǎn)物的生成量看,纖維素碳源低于手紙?zhí)荚?JT3-3菌生成乙醇的能力優(yōu)于JT1

2、菌,但乙酸則反之.β-葡萄糖苷酶(EC3.2.1.21)JT3-3高于JT1菌,而纖維素內(nèi)切酶(EC3.2.1.4)的活力則反之.對(duì)于JT3-3低濃度的葡萄糖抑制纖維素培養(yǎng)基的代謝產(chǎn)物乙醇的形成,對(duì)于手紙培養(yǎng)基則無(wú)影響.低濃度半乳糖與此相反,對(duì)纖維素培養(yǎng)基沒(méi)有影響,而對(duì)于手紙培養(yǎng)基有抑制.低濃度的乳糖對(duì)兩種培養(yǎng)基均無(wú)影響.對(duì)于JT1菌,低濃度的葡萄糖對(duì)纖維素培養(yǎng)基沒(méi)有明顯影響,抑制手紙培養(yǎng)基,而低濃度的乳糖半乳糖對(duì)兩種培養(yǎng)基均有抑制.對(duì)

3、JT3-3菌產(chǎn)發(fā)酵液經(jīng)硫酸銨沉淀和DEAE-Cellulose DE52柱層析梯度洗脫后,SDS-PAGE檢測(cè)得到電泳單點(diǎn),確定纖維素內(nèi)切酶的蛋白質(zhì)分子量約為52kDa,β-葡萄糖苷酶的蛋白質(zhì)分子量約為48kDa.纖維素內(nèi)切酶和β-葡萄糖苷酶的最適反應(yīng)pH值都是pH6.5,纖維素內(nèi)切酶的最適反應(yīng)溫度是80℃,β-葡萄糖苷酶的最適反應(yīng)溫度是40℃,10mM Ca<'2+>和Mg<'2+>對(duì)纖維素內(nèi)切酶和β-葡萄糖苷酶的酶活力沒(méi)有影響,高濃

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