產(chǎn)耐高溫纖維素酶細(xì)菌的篩選及酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf

1、纖維素酶的研究對利用具有巨大潛力的可再生資源--纖維素有重要意義.實驗篩選出了產(chǎn)耐高溫纖維素酶的細(xì)菌菌株,獲得了有良好耐熱性的纖維素酶,并對篩得的菌株的生理生化特性及所產(chǎn)酶的酶學(xué)特性進(jìn)行了研究.實驗利用柴草進(jìn)行高溫堆肥,采樣后用半限制性培養(yǎng)基篩選,篩選過程中,用3,5-二硝基水楊酸比色法測量所產(chǎn)纖維素酶活,并通過測不含菌體的發(fā)酵液酶活,來判斷所產(chǎn)是否為胞外酶,結(jié)果篩得一株能產(chǎn)胞外耐高溫纖維素酶的菌株.通過菌體觀察實驗、菌體運(yùn)動性實驗、V

2、-P實驗、甲基紅實驗、淀粉水解實驗、過氧化氫酶生成測定實驗、碳源利用實驗等,對篩得的菌株進(jìn)行分類鑒定,初步判定其屬于嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillus stearothermophilus).利用鹽析、凝膠過濾層析等方法對纖維素酶進(jìn)行分離純化,用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢驗,電泳結(jié)果中出現(xiàn)多條帶,而Native-聚丙烯酰胺凝膠電泳結(jié)果只顯示一條帶,初步判定其為多亞基結(jié)構(gòu),至少有八個亞基.論文研究了該菌所產(chǎn)纖維素酶的最適溫度、pH值、穩(wěn)