堿性纖維素酶產生菌的分離、選育、發(fā)酵產酶條件及酶學性質研究.pdf

1、本文利用CMC透明圈分離法從土樣中分離獲得1株產堿性纖維素酶的假諾卡氏菌屬(Prauseria)放線菌IS-H，采用液體振蕩培養(yǎng)技術，以6％接種量接種子液于pH8的發(fā)酵產酶培養(yǎng)基中，28℃振蕩培養(yǎng)5d，CMC酶活力達到7.64U/mL。通過對CMC液化力、糖化力及濾紙?zhí)腔y定分析，此菌株產生的酶大部分屬內切β-1，4-葡聚糖苷酶(CMC酶)，對該酶特性進行初步研究，酶的最適反應溫度為40℃，當pH維持于6～11，溫度維持于10～60℃

2、，酶活力可保持在60％以上，能較好地滿足日常洗滌的環(huán)境要求。利用紫外線(UV)對菌株IS-H進行誘變，獲得1株CMC酶活力達到17.59U/mL的突變株MS-H16。當以6％接種量接種子液于pH8，分別以20g/L蔗糖、10g/L硝酸銨為碳、氮源，添加0.5g/LMgSO4的最適產酶培養(yǎng)基中，26℃振蕩培養(yǎng)5d，其酶活力達到18.29U/mL，比初始酶活力提高了6.29倍。 同時以一株產CMC酶的軟化芽孢桿菌(B.maceran

3、s)IS-B為研究對象，在搖瓶振蕩培養(yǎng)條件下，以5％接種量接24h種子液于pH9，分別以4.0％麥芽糖和1.0％蛋白胨為碳、氮源，添加0.5％NaCl和0.1％KH2PO4，裝液量為75mL/250mL的最適產酶培養(yǎng)基中，37℃振蕩培養(yǎng)48h，酶活力達到85.69U/mL；在5L發(fā)酵罐中，以5％接種量接24h種子液于pH10的最適產酶培養(yǎng)基中，37℃發(fā)酵48h，當攪拌速度為400r/min，通氣量為1.0L/min，溶氧值可維持在65％