高產纖維素酶菌株的分離鑒定、誘變選育及產酶條件的研究.pdf

1、從江西傳統發(fā)酵食品中分離目標菌株(實驗室已有研究)，利用稀釋涂平板和顯微單孢子分離相結合方法分離出大量單孢子，再對單孢子進行培養(yǎng)得到數株發(fā)育成熟的單孢子菌株，通過篩選得到產酶活力最高的菌株NC-1-6，采用形態(tài)鑒定和分子生物學鑒定相結合的方法鑒定該菌株為粗壯脈紋孢菌。 研究了菌株NC-1-6以稻草為唯一碳源時，稻草濃度、發(fā)酵溫度及培養(yǎng)基初始pH值對整個生長周期內菌體生長和發(fā)酵產酶的影響。研究發(fā)現：稻草降解率與菌體生長狀況呈正相關

2、，2％濃度時，菌體生長最佳，稻草降解率也最高。菌體生長與產酶的最佳稻草濃度、最適pH值及最適溫度均不一致。菌體生長的最佳稻草濃度為2％，產酶最佳稻草濃度為5％；菌體生長最適初始pH值為5.5，產酶最適初始pH值為4.8；菌體生長最適溫度是先用25℃培養(yǎng)3 d再用30℃，產酶最適溫度是固定30℃。 為了進一步提高產酶能力，以粗壯脈紋孢菌的野生株為出發(fā)菌株，通過紫外線和硫酸二乙酯的處理得到突變株60D7253。分別研究了各誘變劑量

3、與致死率和正變率的關系。菌株的篩選分為初篩和復篩：初篩是測定透明圈直徑與菌落直徑的比值(HC值)，復篩測定發(fā)酵液的濾紙酶活(FP酶活力)和內切酶酶活(Cx酶活力)。突變株60D7253酶活力比出發(fā)株有較大提高，提高幅度分別為：FPA提高179.25％、Cx酶活力提高175.99％、C1酶活力提高147.2％、βG酶活力提高3.83％。 本文還對突變株60D7253發(fā)酵產酶培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進行了優(yōu)化。優(yōu)化后的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件為：選