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1、目的:從VIP受體及其下游信號(hào)因子的調(diào)節(jié)機(jī)制來(lái)探討運(yùn)脾開(kāi)胃法治療厭食癥的深層機(jī)理,進(jìn)而有效地指導(dǎo)臨床。
方法:選用運(yùn)脾開(kāi)胃復(fù)方作為運(yùn)脾開(kāi)胃治法的工具藥,用空白、低、中、高劑量含藥血清作用于人體胃竇平滑肌細(xì)胞,其中低劑量等同于人體等效劑量。運(yùn)用免疫印跡法,從蛋白水平測(cè)定VIP受體(VPAC2)及其下游信號(hào)因子eNOS、p-eNOS、PKA的表達(dá);同時(shí),運(yùn)用硝酸還原酶法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)NO濃度變化趨勢(shì),分析各組數(shù)據(jù)及差異的內(nèi)在涵義。
2、r> 結(jié)果:生理狀態(tài)下,人胃竇平滑肌細(xì)胞只有在經(jīng)中、高劑量含藥血清作用后,VPAC2、eNOS、peNOS蛋白表達(dá)水平降低(P<0.05),但中高劑量組之間無(wú)明顯差異;PKA蛋白水平表達(dá)在各組之間皆無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。除空白組外經(jīng)含藥血清作用后的人胃竇平滑肌細(xì)胞內(nèi)NO濃度皆有降低(P<0.05),但低、中、高組之間并無(wú)明顯差別。
結(jié)論:運(yùn)脾開(kāi)胃工具藥在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中對(duì)胃腸肽的信號(hào)傳導(dǎo)調(diào)節(jié)是級(jí)聯(lián)反應(yīng),VIPR與下游信號(hào)分子表達(dá)量的變化趨
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