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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過(guò)觀察萆薢除痹湯對(duì)大鼠腎組織炎癥因子的調(diào)控作用,探討該方對(duì)尿酸性腎病的作用機(jī)制。
方法:本實(shí)驗(yàn)分兩部分進(jìn)行,第一部分為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分(體內(nèi)實(shí)驗(yàn)),將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為6組(空白組,模型組,西藥組,中藥低劑量組,中藥中劑量組,中藥高劑量組),制備尿酸性腎病大鼠模型(腺嘌呤+乙胺丁醇),造模與給藥同時(shí)進(jìn)行,觀察大鼠一般情況,處死后制作大鼠腎臟病理切片并觀察各組大鼠腎組織病理狀態(tài),檢測(cè)大鼠血尿酸、肌酐、尿素氮,運(yùn)用免疫組織化學(xué)法
2、檢測(cè)各組大鼠NF-κB的蛋白生成狀態(tài),運(yùn)用Western bolt方法檢測(cè)大鼠腎組織中各炎癥指標(biāo)的蛋白表達(dá),運(yùn)用RT-PCR方法檢測(cè)大鼠腎組織中各指標(biāo)的mRNA的表達(dá)。第二部分為細(xì)胞實(shí)驗(yàn)部分(體外實(shí)驗(yàn)),培養(yǎng)、傳代大鼠巨噬細(xì)胞NR8383細(xì)胞,以LPS溶液刺激各組細(xì)胞,制備不同濃度的萆薢除痹湯含藥血清。以Western bolt方法、RT-PCR方法檢測(cè)大鼠巨噬細(xì)胞中各指標(biāo)的蛋白及mRNA表達(dá),并觀察各組之間的區(qū)別。
結(jié)果:<
3、br> 1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果:腺嘌呤+乙胺丁醇的造模方法效果明顯,模型組的尿酸性腎病的病理狀態(tài)明顯。大鼠腎臟病理結(jié)果提示本方能有效減少尿酸鹽的沉積,明顯減輕炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)和腎小管的擴(kuò)張。與模型組相比,余各組大鼠血尿酸值、肌酐、尿素氮明顯降低(P<0.01);大鼠腎組織NF-κB蛋白的生成以及各指標(biāo)的蛋白與基因表達(dá)均降低(P<0.05),并且中高劑量組對(duì)比更為明顯(P<0.01)。
2.細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果:萆薢除痹湯能調(diào)控大鼠NR8
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