雞矢藤環(huán)烯醚萜苷對大鼠尿酸性腎病的防治作用及機(jī)制研究.pdf

1、尿酸性腎病(Uric acid nephropathy,UAN)又稱痛風(fēng)性腎病,是由于血尿酸生成過多或尿尿酸排泄減少致血中尿酸升高而引起的腎臟損害。本課題所用藥物雞矢藤環(huán)烯醚萜苷(Iridiod Glycosides from Paederia Scandens,IGPS)是從藥用植物雞矢藤中提取的一類有效成分,其主要活性成份為雞矢藤苷、雞矢藤次苷及車葉草苷。我們的前期研究結(jié)果顯示,IGPS可以有效降低高尿酸血癥模型動物的血尿酸水平、改

2、善尿酸性腎病大鼠的炎癥反應(yīng)。本課題進(jìn)一步研究了IGPS對尿酸性腎病大鼠的防治作用及其可能的作用機(jī)制。
　　主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1、尿酸性腎病大鼠的制備及IGPS的防治作用
　　采用灌胃給予尿酸前體物質(zhì)酵母膏(15g/kg,ig,bid×42d)和腹腔注射尿酸氧化酶抑制劑氧嗪酸鉀(250mg/kg,ip,qw×6w)聯(lián)合應(yīng)用的方法制備大鼠UAN模型。實(shí)驗(yàn)過程中每天觀察各組大鼠的毛色、神態(tài)、攝食量、進(jìn)水量、尿量和行為活

3、動度等一般情況;分別于造模0d、7d、14d、28d、35d和42d檢測大鼠的體重變化情況;使用無創(chuàng)血壓儀檢測各組大鼠0～6周的血壓變化情況;造模第8d起每天上下午灌胃造模的同時,下午各用藥組分別給予IGPS(280、140、70mg/kg)及別嘌呤醇(50mg/kg)灌胃給藥,每天一次,直至造模結(jié)束。造模42d后檢測各組大鼠血尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Cre),收集24h尿液,計(jì)算尿酸分級排泄率;取腎臟,計(jì)算腎指數(shù);常規(guī)

4、HE染色,觀察腎臟的病理變化。
　　結(jié)果：顯示,IGPS(280、140mg/kg,ig,qd×35d)可明顯改善UAN大鼠的一般癥狀,可增加大鼠體重,抑制血壓升高,降低血尿酸含量,改善腎功能,升高尿酸分級排泄率,降低腎指數(shù)。腎臟光鏡的病理結(jié)果顯示,IGPS(280、140mg/kg,ig,qd×35d)可減少腎組織內(nèi)尿酸鹽沉積,減輕腎臟組織的炎性細(xì)胞浸潤及纖維化程度。提示IGPS對酵母膏和氧嗪酸鉀所致UAN具有較好的防治作用。<

5、br>　　2、IGPS對尿酸性腎病大鼠的防治作用機(jī)制
　　2.1、IGPS對尿酸性腎病大鼠血壓的影響
　　采用無創(chuàng)血壓儀測定大鼠0～6周的血壓變化情況,每周測兩次。結(jié)果顯示,IGPS(280、140mg/kg,ig,qd×35d)可顯著抑制UAN大鼠血壓的升高。免疫組化研究也發(fā)現(xiàn),模型組大鼠腎組織NOS-1幾乎未見表達(dá),IGPS高、中劑量組NOS-1表達(dá)顯著增加,表明藥物可明顯增強(qiáng)NOS-1活性,從而抑制大鼠血壓的升高。提示

6、IGPS抑制UAN大鼠血壓的升高可能是它發(fā)揮對腎臟保護(hù)作用的重要原因。
　　2.2、IGPS對尿酸性腎病大鼠尿酸代謝的影響
　　采用磷鎢酸法測定各組大鼠尿液尿酸、尿肌酐;測定各組大鼠尿液容積,并計(jì)算各組大鼠尿酸分級排泄率。結(jié)果顯示,IGPS(280、140mg/kg,ig,qd×35d)可顯著提高UAN大鼠尿液尿酸水平,IGPS(280mg/kg,ig,qd×35d)可顯著提高UAN大鼠尿液肌酐水平和尿液容積,IGPS(28

7、0、140mg/kg,ig,qd×35d)可促進(jìn)UAN大鼠的尿酸分級排泄。提示IGPS降血尿酸的作用可能與促進(jìn)UAN大鼠的尿酸分級排泄有關(guān)。
　　2.3、IGPS對尿酸性腎病大鼠腎臟組織炎癥因子的影響
　　采用免疫組化法檢測UAN大鼠腎臟組織COX-2及TNF-α蛋白表達(dá);采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測TNF-αmRNA表達(dá)。結(jié)果顯示,IGPS(280、140mg/kg,ig,qd×35d)可顯著降低UAN大

8、鼠腎臟組織COX-2及TNF-α蛋白的表達(dá),且下調(diào)TNF-αmRNA的表達(dá)。表明IGPS可有效保護(hù)炎癥因子介導(dǎo)的腎臟損傷,這可能是它發(fā)揮對腎臟保護(hù)作用的又一重要機(jī)制。
　　2.4、IGPS對尿酸性腎病大鼠腎臟組織纖維化的影響
　　采用免疫組化法檢測腎組織TGF-β1表達(dá);采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法檢測TGF-β1mRNA表達(dá)。結(jié)果顯示,IGPS(280、140mg/kg,ig,qd×35d)可抑制UAN大鼠腎小管間質(zhì)TGF-