黑腹果蠅Neurexin精確定位研究.pdf

1、神經(jīng)遞質(zhì)受體，粘附分子及其它支架分子和信號(hào)分子在突觸的正確組裝對(duì)整個(gè)腦的完整性和連接性及正確的神經(jīng)遞質(zhì)釋放起著至關(guān)重要的作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)Neurexin及Neuroligin這對(duì)分子在突觸形成及突觸行使功能中起著重要作用。 Neurexin當(dāng)初是因?yàn)樗軌蚺c黑蜘蛛毒素α-latrotoxin相互作用而被發(fā)現(xiàn)的。哺乳動(dòng)物里共有三個(gè)neurexin基因，分別是neurexinⅠ，neurexinⅡ及neurexinⅢ，這三個(gè)基

2、因各有兩個(gè)不同的啟動(dòng)子。我們通過生物信息學(xué)分析及實(shí)驗(yàn)證明果蠅基因組中只有一個(gè)neurexin基因（neurexin-1），且只有一種轉(zhuǎn)錄形式（CG7050），在預(yù)測(cè)的結(jié)構(gòu)上與高等動(dòng)物里的α-neurexin有著很大的同源性。本實(shí)驗(yàn)室先前的研究表明Neurexin-1表達(dá)在果蠅胚胎的神經(jīng)系統(tǒng)，而且在胚胎早期就開始表達(dá)。免疫熒光染色證明它在胚胎、幼蟲及成蟲里都集中于腦及腹神經(jīng)管的突觸密集區(qū)分布，并和一些突觸標(biāo)記分子共定位。但是Neurexi

3、n的突觸精細(xì)定位目前還未知曉。 免疫電鏡技術(shù)是可以在超微結(jié)構(gòu)水平對(duì)目的分子進(jìn)行精確定位的一種方法，其中包埋前免疫電鏡技術(shù)具有操作相對(duì)簡(jiǎn)單，背景少等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛麻用于一些人們感興趣分子的定位研究。因此本文以果蠅為模式生物，利用包埋前免疫電鏡技術(shù)對(duì)Neurexin進(jìn)行精確定位。 通過在果蠅神經(jīng)系統(tǒng)（NMJ和VNC）建立包埋前免疫電鏡技術(shù)，發(fā)現(xiàn)在果蠅三齡幼蟲內(nèi)源性的Neurexin主要定位在突觸位點(diǎn)，突觸前后都有分布，但在突觸