七種中藥對(duì)口腔白色念珠菌的體外抑制作用.pdf

1、白色念珠菌，廣泛存在于自然界及人體的口腔、呼吸道、消化道及陰道黏膜中，為條件致病性真菌，正常情況下不會(huì)導(dǎo)致疾病發(fā)生。當(dāng)某些因素破壞了機(jī)體內(nèi)菌群平衡，白色念珠菌則轉(zhuǎn)變?yōu)橹虏【?，在局部大量生長(zhǎng)繁殖，引起局部甚至全身性疾病。近年來(lái)，由于廣譜抗菌藥物、激素、免疫抑制劑等藥物的大量應(yīng)用，介入手術(shù)的普及，惡性腫瘤、艾滋病等疾病發(fā)病率逐年上升等因素，使得念珠菌感染發(fā)病率逐年升高。目前，唑類藥物是臨床治療和預(yù)防念珠菌感染的首選藥物，唑類藥物的大量應(yīng)用，

2、在治療念珠菌感染的同時(shí)又使念珠菌的耐藥性提高，尤其是白色念珠菌。因此，尋找高效低毒、安全有效且不易產(chǎn)生耐藥菌株的新型藥物迫在眉睫。
　　我國(guó)有著豐富的中藥資源，在長(zhǎng)期研究中發(fā)現(xiàn)，很多中藥都具有抗白色念珠菌的作用，而且某些中藥在較低濃度時(shí)就具有顯著效果。因此，研究中藥對(duì)白色念珠菌的抑制作用，對(duì)白色念珠菌的臨床用藥具有積極的指導(dǎo)意義。
　　目的:
　　研究七種中藥五味子、當(dāng)歸、黃連、瑞香狼毒、吳茱萸、金銀花、透骨草對(duì)口腔白

3、色念珠菌臨床菌株的抑制作用;確定七種藥物的75％乙醇提取物在不同濃度作用下對(duì)口腔白色念珠菌臨床菌株的抑制率，為中藥抗白色念珠菌藥物的研究、開(kāi)發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:
　　1七種中藥的提取
　　將七種中藥干燥、粉碎，均稱量60 g，分別置于1000ml容量瓶中，用75％乙醇溶液600 mL浸泡1.0h，81℃水浴回流提取1.0h，保留提取液，重復(fù)提取三次，提取液合并，減壓過(guò)濾，濾液分別減壓蒸餾至無(wú)乙醇味，濃縮物用蒸餾

4、水定容為2 g/mL生藥。然后低溫離心，取上清液，用0.22μm孔徑的濾菌器濾除提取物中細(xì)菌后置于棕色瓶中，于冰箱中4℃保存?zhèn)溆谩?br>　　2七種中藥提取物的體外抑菌實(shí)驗(yàn)
　　實(shí)驗(yàn)菌株為口腔白色念珠菌臨床菌株。實(shí)驗(yàn)應(yīng)用改良倍比稀釋法檢測(cè)七種中藥75％乙醇提取物對(duì)口腔白色念珠菌的抑制作用。取無(wú)菌小試管5支作為一組，分別標(biāo)記試管標(biāo)號(hào)為1、2、3、4、5，共23組。每管加沙氏培養(yǎng)液1.0 ml，再向第一管加藥液1.0 ml，從第一管開(kāi)

5、始倍比稀釋至每根試管中藥物的最終濃度依次為:1 g/ml，0.5 g/ml，0.25 g/ml，0.125 g/ml，0.0625 g/ml。同樣方法制備23組試管，每組五根，實(shí)驗(yàn)時(shí)將23種實(shí)驗(yàn)菌液分別加入這23組含藥液培養(yǎng)基的試管中，每管0.1 ml菌液。同時(shí)另取3支試管，分別標(biāo)記為“沙氏培養(yǎng)液對(duì)照”，“藥物原液對(duì)照(2 g/ml)”，“測(cè)試菌生長(zhǎng)對(duì)照”。以上為一種藥物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，同樣建立其余六種藥物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。所有試管搖勻后放置37℃恒

6、溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24 h后觀察結(jié)果。在對(duì)照管符合要求的情況下，將各實(shí)驗(yàn)管的培養(yǎng)物接種至沙氏瓊脂培養(yǎng)基的平板上，確定是否有細(xì)菌生長(zhǎng)。37℃恒溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果，以瓊脂平板上完全無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng)為標(biāo)準(zhǔn)，記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，計(jì)算七種中藥75％乙醇提取物在不同濃度作用下對(duì)23株白色念珠菌臨床菌株的抑制率。
　　結(jié)果:
　　七種中藥的75％乙醇提取物在濃度分別為1.0 g/ml、0.5 g/ml、0.25g/ml、0.125 g/ml、0.

7、0625 g/ml時(shí)對(duì)口腔白色念珠菌的抑制率分別為:
　　五味子:91.30％、17.39％、8.70％、4.35％、4.35％
　　當(dāng)歸:73.91％、17.39％、4.35％、4.35％、4.35％
　　黃連:65.22％、30.43％、13.04％、8.70％、4.35％
　　瑞香狼毒:43.48％、13.04％、8.70％、4.35％、4.35％
　　吳茱萸:43.48％、13.04％、13.04％

8、、8.70％、4.35％
　　金銀花:20.09％、8.70％、8.70％、4.35％、4.35％
　　透骨草:13.04％、4.35％、4.35％、4.35％、4.35％
　　七種中藥的75％乙醇提取物在各濃度下對(duì)第四株口腔白色念珠菌臨床菌株的抑制率均為100％。
　　吳茱萸75％乙醇提取物在各濃度下對(duì)第五株口腔白色念珠菌臨床菌株的抑制率均為100％。
　　結(jié)論:
　　1體外抑菌試驗(yàn)顯示，五味子、當(dāng)