七種中藥對口腔白色念珠菌的體外抑制作用.pdf

1、白色念珠菌，廣泛存在于自然界及人體的口腔、呼吸道、消化道及陰道黏膜中，為條件致病性真菌，正常情況下不會導致疾病發(fā)生。當某些因素破壞了機體內(nèi)菌群平衡，白色念珠菌則轉(zhuǎn)變?yōu)橹虏【?，在局部大量生長繁殖，引起局部甚至全身性疾病。近年來，由于廣譜抗菌藥物、激素、免疫抑制劑等藥物的大量應(yīng)用，介入手術(shù)的普及，惡性腫瘤、艾滋病等疾病發(fā)病率逐年上升等因素，使得念珠菌感染發(fā)病率逐年升高。目前，唑類藥物是臨床治療和預防念珠菌感染的首選藥物，唑類藥物的大量應(yīng)用，

2、在治療念珠菌感染的同時又使念珠菌的耐藥性提高，尤其是白色念珠菌。因此，尋找高效低毒、安全有效且不易產(chǎn)生耐藥菌株的新型藥物迫在眉睫。
　　我國有著豐富的中藥資源，在長期研究中發(fā)現(xiàn)，很多中藥都具有抗白色念珠菌的作用，而且某些中藥在較低濃度時就具有顯著效果。因此，研究中藥對白色念珠菌的抑制作用，對白色念珠菌的臨床用藥具有積極的指導意義。
　　目的:
　　研究七種中藥五味子、當歸、黃連、瑞香狼毒、吳茱萸、金銀花、透骨草對口腔白

3、色念珠菌臨床菌株的抑制作用;確定七種藥物的75％乙醇提取物在不同濃度作用下對口腔白色念珠菌臨床菌株的抑制率，為中藥抗白色念珠菌藥物的研究、開發(fā)提供實驗依據(jù)。
　　方法:
　　1七種中藥的提取
　　將七種中藥干燥、粉碎，均稱量60 g，分別置于1000ml容量瓶中，用75％乙醇溶液600 mL浸泡1.0h，81℃水浴回流提取1.0h，保留提取液，重復提取三次，提取液合并，減壓過濾，濾液分別減壓蒸餾至無乙醇味，濃縮物用蒸餾

4、水定容為2 g/mL生藥。然后低溫離心，取上清液，用0.22μm孔徑的濾菌器濾除提取物中細菌后置于棕色瓶中，于冰箱中4℃保存?zhèn)溆谩?br>　　2七種中藥提取物的體外抑菌實驗
　　實驗菌株為口腔白色念珠菌臨床菌株。實驗應(yīng)用改良倍比稀釋法檢測七種中藥75％乙醇提取物對口腔白色念珠菌的抑制作用。取無菌小試管5支作為一組，分別標記試管標號為1、2、3、4、5，共23組。每管加沙氏培養(yǎng)液1.0 ml，再向第一管加藥液1.0 ml，從第一管開

5、始倍比稀釋至每根試管中藥物的最終濃度依次為:1 g/ml，0.5 g/ml，0.25 g/ml，0.125 g/ml，0.0625 g/ml。同樣方法制備23組試管，每組五根，實驗時將23種實驗菌液分別加入這23組含藥液培養(yǎng)基的試管中，每管0.1 ml菌液。同時另取3支試管，分別標記為“沙氏培養(yǎng)液對照”，“藥物原液對照(2 g/ml)”，“測試菌生長對照”。以上為一種藥物實驗模型，同樣建立其余六種藥物實驗模型。所有試管搖勻后放置37℃恒

6、溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24 h后觀察結(jié)果。在對照管符合要求的情況下，將各實驗管的培養(yǎng)物接種至沙氏瓊脂培養(yǎng)基的平板上，確定是否有細菌生長。37℃恒溫箱內(nèi)，培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果，以瓊脂平板上完全無細菌生長為標準，記錄實驗數(shù)據(jù)，計算七種中藥75％乙醇提取物在不同濃度作用下對23株白色念珠菌臨床菌株的抑制率。
　　結(jié)果:
　　七種中藥的75％乙醇提取物在濃度分別為1.0 g/ml、0.5 g/ml、0.25g/ml、0.125 g/ml、0.

7、0625 g/ml時對口腔白色念珠菌的抑制率分別為:
　　五味子:91.30％、17.39％、8.70％、4.35％、4.35％
　　當歸:73.91％、17.39％、4.35％、4.35％、4.35％
　　黃連:65.22％、30.43％、13.04％、8.70％、4.35％
　　瑞香狼毒:43.48％、13.04％、8.70％、4.35％、4.35％
　　吳茱萸:43.48％、13.04％、13.04％

8、、8.70％、4.35％
　　金銀花:20.09％、8.70％、8.70％、4.35％、4.35％
　　透骨草:13.04％、4.35％、4.35％、4.35％、4.35％
　　七種中藥的75％乙醇提取物在各濃度下對第四株口腔白色念珠菌臨床菌株的抑制率均為100％。
　　吳茱萸75％乙醇提取物在各濃度下對第五株口腔白色念珠菌臨床菌株的抑制率均為100％。
　　結(jié)論:
　　1體外抑菌試驗顯示，五味子、當