胡桃楸水提物對(duì)白色念珠菌生物膜形成抑制作用的研究.pdf

1、目的:探討白色念珠菌生物膜對(duì)中藥胡桃楸水提物的敏感性。白色念珠菌易在人體內(nèi)形成生物膜且易對(duì)抗真菌藥物形成耐藥,因此首先應(yīng)該對(duì)白色念珠菌在體外形成的生物膜進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,以便進(jìn)一步了解其相關(guān)特征。本研究通過體外形成白色念珠菌生物膜結(jié)構(gòu),觀察白色念珠菌生物膜形成過程中不同時(shí)期的生長(zhǎng)特點(diǎn)及形態(tài)特征,并以臨床常用抗真菌藥物兩性霉素B和卡泊芬凈為對(duì)照藥物,比較中藥胡桃楸水提物對(duì)白色念珠菌生物膜的作用效果,目的在探討胡桃楸水提物對(duì)白色念珠菌生物膜的

2、抑制作用,為臨床治療白色念珠菌感染提供理論依據(jù)。
　　 方法:本實(shí)驗(yàn)采用6孔培養(yǎng)板,體外培養(yǎng)形成白色念珠菌生物膜結(jié)構(gòu),在顯微鏡下觀察不同培養(yǎng)時(shí)間的生物膜結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。另采用96孔培養(yǎng)板,體外培養(yǎng)形成白色念珠菌生物膜,以結(jié)晶紫染色法分析生物膜體外生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué),以XTT還原法定量測(cè)定胡桃楸水提物、兩性霉素B和卡泊芬凈三種藥物抑制白色念珠菌生物膜50%和80%細(xì)胞活性的最低藥物濃度,比較三種藥物抗白色念珠菌生物膜效力。
　　 結(jié)果:

3、白色念珠菌生物膜內(nèi)細(xì)胞數(shù)量隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而增加,最初8h膜內(nèi)細(xì)胞數(shù)量增加顯著,培養(yǎng)48h時(shí),生物膜內(nèi)細(xì)胞數(shù)量達(dá)到最高并趨于穩(wěn)定,鏡下可見典型的成熟生物膜結(jié)構(gòu)。2h組與4h組,8h組與12h組,48h組與72h組之間無明顯差別(P＞0.05),其他組間具有明顯差異(P＜0.05)。生物膜成熟時(shí),細(xì)胞數(shù)量趨于平衡狀態(tài),但仍保持在高水平。隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng),白色念珠菌生物膜耐藥性逐漸增強(qiáng),而且對(duì)藥物的濃度具有一定依賴性。生物膜48h成熟時(shí),胡桃楸