香蓮方對(duì)白念珠菌生物膜體外模型影響的代謝組學(xué)研究

1、廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明： 所呈交的學(xué)位論文，是個(gè)人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)特別加以注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明并致謝。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名杰幽塑} ．日期：出／驢年籮月2 伊日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解廣州中醫(yī)藥大學(xué)有關(guān)保留使用

2、學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許被查閱和借閱。本人授權(quán)廣州中醫(yī)藥大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)印手段保存和匯編本學(xué)位論文。( 保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名舛論文導(dǎo)師簽名日期：o 功f 畢年f 月即日可能與磷酸戊糖通路有關(guān)。5 ．對(duì)藥物干預(yù)后的白念珠菌懸浮菌的代謝分析表明，香蓮?fù)庀匆航M、氟康唑組和未加藥物的陽性對(duì)照組3 者的

3、代謝模式可以較好分離。經(jīng)鑒定，m ／z 為2 4 7 ．0 9 6 4 為可能的差異代謝物，它被初步鑒定為L(zhǎng) i p o a m i d e ，它是谷胱甘肽的氧化形式，谷胱甘肽是一種含y 一酰胺鍵和巰基的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸組成。6 ．香蓮?fù)庀匆?、氟康唑干預(yù)后的早期( 4 h ) 、中期( 2 4 h ) 、成熟期( 4 8 h ) 的白念珠菌生物膜，其代謝模式均發(fā)生改變，均能較好地與未加藥物陽性對(duì)照的早期( 4 h ) 、

4、中期( 2 4 h ) 、成熟期( 4 8 h ) 生物膜分離。結(jié)果表明，m ／z 為2 0 6 ．0 8 1 0 的代謝物可能是不同藥物作用后4 h 生物膜的潛在差異代謝物，被初步鑒定為Q u i n a l d i ca c i d ( 喹哪啶酸) ，是L 一色氨酸分解代謝的產(chǎn)物；m ／z 為3 7 9 ．2 0 9 8 的代謝物可能是不同藥物作用后2 4 h 生物膜的潛在的差異代謝物，被初步鑒定為T y r o s y l —h

5、r g i n i n e ( 酪氨酰一精氨酸) ，是一種酪氨酸和精氨酸組成的二肽，是蛋白質(zhì)消化或蛋白質(zhì)分解的不完全分解產(chǎn)物，大多數(shù)只是作為進(jìn)一步水解的途徑上特定的氨基酸降解途徑短暫的中間體，一些具有生理或細(xì)胞信號(hào)的影響；m ／z 為3 8 7 ．1 7 5 4 的代謝物為可能是不同藥物作用后4 8 h 生物膜的差異代謝物，被初步鑒定為I n d o l e a c e t y lg l u t a m i n e ( 吲哚乙酰谷氨酰胺

6、) ，是色氨酸的吲哚衍生物，是色氨酸代謝的分解產(chǎn)物。7 ．不同濃度的香蓮?fù)庀匆焊深A(yù)早、中、成熟期的白念珠菌生物膜后的代謝比較，結(jié)合載荷圖及V I P 值，發(fā)現(xiàn)m ／z 為2 0 1 ．1 1 2 1 的代謝物為可能的差異代謝物，它被初步鑒定為4 一H y d r o x y n o n e n a l ，是脂質(zhì)過氧化的主要終產(chǎn)物之一，已被證明它參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，可以影響細(xì)胞周期；不同濃度的氟康唑干預(yù)早、中、成熟期的白念珠菌生物膜后的代謝比較

7、，結(jié)合載荷圖及V I P 值，發(fā)現(xiàn)m ／z 為1 7 5 ．0 2 1 8 的代謝物為可能的差異代謝物，被初步鑒定為3 - D e h y d r o - L —g u l o n a t e ( 3 一脫氫一L 一古洛糖酸) ，是D - X y l u l o s e5 - p h o s p h a t e ( D 一木酮糖一5 一磷酸) 合成的第四至最后一步，與酪氨酸和色氨酸的代謝、脂肪和類脂的代謝等多方面具有重要意義。8 ．香蓮

8、外洗液、氟康唑預(yù)先包被9 6 孔培養(yǎng)板對(duì)形成的白念珠菌生物膜代謝模式產(chǎn)生影響，可以較好分離。其中，m ／z 為1 4 4 ．9 2 2 5 的代謝物被初步鑒定為S u p e r o x i d e( 超氧化物) ，是0 。的陰離子形式，它的生物毒性可以滅活多種代謝途徑的酶，從而導(dǎo)致細(xì)胞損傷，是氧化應(yīng)激的一個(gè)主要因素。結(jié)論：1 ．香蓮?fù)庀匆旱腗 I C 為1 ．9 5 m g ／m l 時(shí)與氟康唑的4u g ／m L 對(duì)該菌的效力相當(dāng)，