孕期暴露細(xì)菌脂多糖對雌性子代代謝表型的影響.pdf

1、目的:宮內(nèi)發(fā)育遲緩(IUGR)與成年時(shí)期發(fā)生代謝性疾病的風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)。早期研究發(fā)現(xiàn)妊娠晚期暴露細(xì)菌脂多糖(LPS)可以導(dǎo)致胎兒IUGR的發(fā)生。本實(shí)驗(yàn)的目的是探索孕期暴露LPS對雌性子代成年時(shí)期代謝表型的影響。
　　方法：20只ICR孕鼠被隨機(jī)分配為兩組, LPS組孕鼠在妊娠15天(GD15)到GD17天每天被給予腹腔注射LPS(50μg/kg),對照組在GD15到GD17天腹腔注射等容積的生理鹽水(NS)。斷乳后，雌性仔鼠被隨機(jī)分

2、配為四組。SD組：對照組母鼠的雌性子代，給予標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)；LPS組：LPS組母鼠的雌性子代,給予標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)；HFD組：對照母鼠的雌性子代，給予高脂飼料喂養(yǎng)；LPS+HFD組：LPS組母鼠的雌性子代,給予高脂飼料喂養(yǎng)。4周飲食干預(yù)之后，每兩周用血糖儀測量空腹血糖。在飲食干預(yù)8周和12周后，均進(jìn)行葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)(GTT)和胰島素耐量實(shí)驗(yàn)(ITT)。14周的飲食干預(yù)后，所有實(shí)驗(yàn)小鼠用50mg/kg的苯巴比妥鈉麻醉并處死。收集血清，用全自動(dòng)生

3、化分析儀測定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL)、C反應(yīng)蛋白等指標(biāo)；用酶聯(lián)免疫吸附試劑盒(ELISA）測定血清胰島素、腫瘤壞死因子-α的水平。收集肝臟和脂肪組織，稱重，部分用4％的多聚甲醛固定后用于組織學(xué)檢查，剩余部分用液氮速凍后-80℃保存，用于肝臟和脂肪組織蛋白免疫印跡(Western blot)實(shí)驗(yàn)及肝臟甘油三酯含量測定。
　　結(jié)果：(1)孕期暴露 LPS(50μg/

4、kg)會(huì)導(dǎo)致 IUGR的發(fā)生，斷奶時(shí)雌性仔鼠體重LPS組仍低于對照組(LPS組14.90±0.23g，對照組15.80±0.25 g， P<0.01)。但孕期暴露LPS不增加雌性仔鼠成年期體重；且孕期暴露LPS不加重高脂飲食誘導(dǎo)的雌性仔鼠成年期體重增加。(2)孕期暴露 LPS不增加雌性仔鼠脂肪量；孕期暴露LPS不加重高脂飲食誘導(dǎo)的雌性仔鼠脂肪量增加。(3)孕期暴露LPS不增加雌性仔鼠的肝重、肝臟甘油三酯含量以及循環(huán)脂質(zhì)含量；孕期暴露 L

5、PS不加重高脂飲食誘導(dǎo)的雌性仔鼠肝重、肝臟甘油三酯含量以及循環(huán)脂質(zhì)含量增加。(4)孕期暴露LPS不增加雌性仔鼠空腹血糖及血清胰島素水平；孕期暴露LPS不加重高脂飲食誘導(dǎo)的雌性仔鼠空腹血糖及血清胰島素水平升高。(5)孕期暴露LPS不損害雌性仔鼠糖耐量及胰島素敏感性；孕期暴露 LPS不加重高脂飲食誘導(dǎo)的雌性仔鼠糖耐量及胰島素敏感性受損。(6)孕期暴露LPS不降低雌性子代脂肪及肝臟組織中pAKT的表達(dá)水平；孕期暴露 LPS不加劇高脂飲食誘導(dǎo)的