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
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文檔簡介
1、目的:
研究力竭運(yùn)動與鈍挫傷對大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞體外增殖及Hes1、Jagged1、Pax7含量的影響。
方法:
將42只五周齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為7組,每組6只:安靜對照組(control,C)、力竭運(yùn)動即刻組(Exhaustive,E0)、力竭后24h組(E24)、力竭后48h組(E48)、鈍挫傷即刻組(Contusion,D0)、鈍挫傷24h組(D24)、鈍挫傷48h組(D48)。力竭運(yùn)動是進(jìn)行一次力
2、竭性下坡跑運(yùn)動均達(dá)到力竭狀態(tài)。安靜對照組、各力竭運(yùn)動組及鈍挫傷組分別在安靜狀態(tài)、力竭后、鈍挫傷后不同的時間點(diǎn)進(jìn)行處死、取血。處死時用20%的烏拉坦麻醉,取左側(cè)腓腸肌,將取下組織一分為二,一份立刻進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗,另一份先用液氮保存,后轉(zhuǎn)至-80℃冰箱保存,ELISA測定血清及骨骼肌中Hes1、Jagged1、Pax7含量的變化。另取新生鼠一只,取其左側(cè)腓腸肌進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗。
結(jié)果:
(1)肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果:成功分
3、離消化了肌組織,在體外獲得高純度具有成肌能力的肌衛(wèi)星細(xì)胞;培養(yǎng)初期階段,新生鼠的肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖速度最快,含量最高,培養(yǎng)第一天,培養(yǎng)皿中便可見少量紡錘形的單核細(xì)胞出現(xiàn),其他各組未見明顯的細(xì)胞增殖現(xiàn)象。新生鼠第四天大量增殖,到第五天衛(wèi)星細(xì)胞相互融合形成多核的肌管;而其他各組在前期則增殖相對較慢,但第五天開始大量增殖,第七天達(dá)到高峰,基本布滿大部分培養(yǎng)皿,之后每組的增殖速度均開始下降;安靜對照組肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖最慢,含量最少,未見明顯的增殖現(xiàn)象
4、;力竭組與鈍挫傷組介于新生鼠和安靜組之間,并且鈍挫傷組衛(wèi)星細(xì)胞含量相對較多。
(2) Elisa結(jié)果:力竭運(yùn)動組、鈍挫傷組骨骼肌和血清中Hes1、Jagged1、Pax7的含量與安靜對照組比較,顯著增高,具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);力竭運(yùn)動各組骨骼肌、血清中Hes1、Jagged1、Pax7的含量組間比較,E0略低于E24組與E48組,無顯著差異,E24組與E48組無顯著差異,不具有統(tǒng)計學(xué)意義;鈍挫傷各組骨骼肌、血清中He
5、s1、Jagged1、Pax7含量組間比較,即刻組略低于24h組與48h組,無顯著差異,D24組與D48組無顯著差異,不具統(tǒng)計學(xué)意義;鈍挫傷組骨骼肌和血清中Hes1、Jagged1、Pax7的含量與力竭運(yùn)動組比較,鈍挫傷組略高于力竭運(yùn)動組,不具統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)論:
(1)安靜對照組未見明顯的衛(wèi)星細(xì)胞增殖。力竭運(yùn)動和鈍挫傷均可以激活衛(wèi)星細(xì)胞,使其增殖分化,且鈍挫傷對衛(wèi)星細(xì)胞的刺激更強(qiáng)烈,增殖數(shù)量略大于力竭組。
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