力竭運(yùn)動(dòng)及鈍挫傷對(duì)大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞體外增殖及AXIN、GSK-3β含量的影響.pdf

1、研究目的:研究力竭運(yùn)動(dòng)及鈍挫傷對(duì)大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞體外增殖及AXIN、GSK-3β含量的影響。
　　研究方法:五周齡雄性SD大鼠24只，分為4組:對(duì)照組(Control，C);力竭運(yùn)動(dòng)即刻組(Exhaustive，E0);力竭運(yùn)動(dòng)后24h組(E24);力竭運(yùn)動(dòng)后48h組(E48)，一次性力竭下坡跑運(yùn)動(dòng)達(dá)到力竭狀態(tài)。另取18只SD大鼠，分為三組:鈍挫傷即刻組(contusion，Do);鈍挫傷后24h組(D24);鈍挫傷后48h組(

2、D48)。對(duì)照組、力竭運(yùn)動(dòng)組、鈍挫傷組于安靜狀態(tài)、末次力竭后、鈍挫傷后不同時(shí)間點(diǎn)，采用20％烏拉坦麻醉，宰殺后從腹主動(dòng)脈取血5ml以制備血清，測(cè)定AXIN、GSK-3β含量的變化;取左側(cè)股四頭肌，一分為二，一份立即進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，另一份樣本液氮保存，測(cè)定AXIN、GSK-3β含量的變化。同時(shí)取左側(cè)腓腸肌用于冰凍切片，觀察肌纖維類(lèi)型。另取新生鼠三只，亦取股四頭肌進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。
　　研究結(jié)果:(1)肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示:通過(guò)分

3、離消化大鼠肌肉組織，可在體外培養(yǎng)獲得高純度具有成肌能力的肌衛(wèi)星細(xì)胞。培養(yǎng)初期階段，除新生鼠外各組的肌衛(wèi)星細(xì)胞增長(zhǎng)速度較慢，到第五天時(shí)各組開(kāi)始大量增殖，第七天時(shí)達(dá)到增殖的高峰，隨后增殖速度下降。各組培養(yǎng)之間結(jié)果比較可見(jiàn)，安靜對(duì)照組骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞含量最少，增殖速度緩慢;新生鼠的骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞含量最高，增殖速度最快;而鈍挫傷組的骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)量明顯多于力竭運(yùn)動(dòng)組，增殖速度也快于力竭運(yùn)動(dòng)組。
　　(2) ATP酶染色結(jié)果顯示:骨骼肌快肌

4、纖維呈黑褐色，慢肌纖維呈灰白色;相同視角下慢肌纖維的橫切面積明顯小于快肌纖維橫切面積，并且力竭運(yùn)動(dòng)組的肌纖維密度大于鈍挫傷組。與對(duì)照組比較，相同視角下，力竭運(yùn)動(dòng)組Ⅰ型肌纖維百分比明顯降低(P＜0.01)，力竭運(yùn)動(dòng)組Ⅱ型肌纖維百分比明顯增加(P＜0.01);鈍挫傷組Ⅰ型肌纖維百分比降低(P＜0.01)，鈍挫傷組Ⅱ型肌纖維百分比增加(P＜0.01)。
　　(3) Elisa結(jié)果顯示:力竭運(yùn)動(dòng)組、鈍挫傷組骨骼肌、血清中AXIN、GSK-

5、3β的含量與對(duì)照組相比較均顯著下降，且具有顯著性差異，而力竭各組、鈍挫傷各組之間無(wú)顯著性差異。
　　研究結(jié)論:(1)力竭運(yùn)動(dòng)及鈍挫傷可使肌衛(wèi)星細(xì)胞激活增殖分化，數(shù)量增殖變多;并且鈍挫傷組的骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖數(shù)量明顯多于力竭運(yùn)動(dòng)組，可能由于鈍挫傷的刺激更強(qiáng)所致。新生鼠肌衛(wèi)星細(xì)胞活性最強(qiáng)，細(xì)胞增殖情況明顯。
　　(2)力竭運(yùn)動(dòng)組Ⅰ型肌纖維百分比降低，Ⅱ型肌纖維百分比增加;鈍挫傷組Ⅰ型肌纖維百分比降低，Ⅱ型肌纖維百分比增加，皆有顯