太平洋牡蠣（Crassostrea gigas）三倍體誘導(dǎo)劑6-DMAP的安全性評(píng)價(jià).pdf

1、貝類(lèi)養(yǎng)殖具有食物鏈短、定居性強(qiáng)、育苗和養(yǎng)殖基礎(chǔ)好、成本相對(duì)較低等特點(diǎn)，已成為我國(guó)沿海地區(qū)海水養(yǎng)殖的重要支柱產(chǎn)業(yè)之一。而三倍體貝類(lèi)由于育性差、生長(zhǎng)快、品質(zhì)好等諸多優(yōu)點(diǎn)成為貝類(lèi)養(yǎng)殖中重點(diǎn)，三倍體育種技術(shù)已在太平洋牡蠣等主要經(jīng)濟(jì)貝類(lèi)中進(jìn)行了產(chǎn)業(yè)化推廣應(yīng)用。誘導(dǎo)多倍體的方法很多，其中6-DMAP由于其低毒、高效、價(jià)廉等特點(diǎn)，在三倍體育種生產(chǎn)中應(yīng)用最為廣泛。但6-DMAP的環(huán)境殘留問(wèn)題不容忽視，使用完后如果未經(jīng)處理，一旦通過(guò)水體進(jìn)入海洋中，就有可

2、能影響海洋生物，再通過(guò)食物鏈(網(wǎng))產(chǎn)生生物放大效應(yīng)后威脅人體健康，且國(guó)內(nèi)外對(duì)6-DMAP安全性問(wèn)題報(bào)道較少。因此，本文以6-DMAP為研究對(duì)象，通過(guò)活體(in vivo)和離體(in vitro)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行6-DMAP的安全性評(píng)價(jià)。 研究結(jié)果表明： (1)6-DMAP影響太平洋牡蠣三倍體受精與早期發(fā)育過(guò)程并對(duì)生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生不利影響。用600 mM 6-DMAP處理太平洋牡蠣(Crassostrea gigas)15 mi

3、n，6-DMAP對(duì)三倍體受精與早期發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)影響表現(xiàn)為：線粒體輕微變形，部分線粒體有內(nèi)嵴溶解現(xiàn)象并可見(jiàn)局部形成低電子密度區(qū)；卵黃量大且電子密度較高，部分卵黃變形，少數(shù)卵黃中出現(xiàn)少量空白區(qū)且有輕微變形；內(nèi)質(zhì)網(wǎng)輕微腫脹，部分核糖體脫落；局部核膜變形，伴有輕微溶解；2-8細(xì)胞期核膜呈現(xiàn)輕微水腫，線粒體內(nèi)嵴溶解較為明顯。 (2)6-DMAP對(duì)細(xì)胞間緊密連接具有拉開(kāi)作用，增加了細(xì)胞膜通透性。6μM、300μ和3000μM三個(gè)

4、濃度6-DMAP處理Caco-2細(xì)胞，其TEER值隨作用時(shí)間增加顯著減小。 (3)6-DMAP可能具有類(lèi)雌激素活性。93.75μM、187.5μM、375μM、750μM、1500μM的6-DMAP均能引起MCF-7的顯著增殖，3000μM6-DMAP極顯著促進(jìn)MCF-7增殖。 (4)6-DMAP可能具有潛在的致癌性。500μM的6-DMAP處理組顯著抑制Balb/c3t3 A31細(xì)胞DNA合成，1000μM的6-D

5、MAP處理組DNA合成數(shù)量極顯著下降。隨著6-DMAP濃度的增加，DNA合成數(shù)目逐漸減少，對(duì)Balb/c3t3 A31細(xì)胞DNA合成的阻礙作用增強(qiáng)，增加了細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的機(jī)率。 (5)6-DMAP對(duì)神經(jīng)分化有促進(jìn)作用，但同時(shí)抑制AChE活性，具有影響神經(jīng)傳遞和調(diào)控的作用。經(jīng)6-DMAP處理，1250μM處理組的PC12細(xì)胞神經(jīng)突起生長(zhǎng)狀況與NGF組基本相同，但500μM、750μM、1000 μM、1250μM6-DMAP處理組