太平洋牡蠣（Crassostrea gigas Thunberg）中氨基酸和寡肽的提取及活性初步研究.pdf

1、本文以太平洋牡蠣為原料，較系統(tǒng)研究了其所含的各種營養(yǎng)成分如各種微量元素、氨基酸、糖元、蛋白質(zhì)等的含量，并對牡蠣寡肽的制備和其抗癌活性進行了初步研究，為進一步深入的研究牡蠣中各種活性成分，提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。 首先，太平洋牡蠣中含有豐富的?；撬?，本文采取了水提、離子交換、結(jié)晶和重結(jié)晶對牛磺酸提取分離工藝；利用薄層色譜、紅外光譜、核磁共振色譜等方法鑒定了結(jié)構(gòu)，為下一步大量生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。其次，本文應(yīng)用原子熒光光譜、原子吸收分光光度計和火

2、焰原子吸收等方法分別對太平洋牡蠣中的微量元素硒、鉻、鎘、鈷、鎳、鉬、鋅、銅、鍶和錳等的含量進行了分析。其中硒、鋅的含量較高。其次，制備了丙酮脫脂蛋白，采用胃蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶五種商業(yè)酶對蛋白質(zhì)進行酶解，經(jīng)比較選擇了胰蛋白酶作為工具酶，并對酶解條件和時間分別采用正交實驗和Tricine-SDS-PAGE電泳法進行優(yōu)化。胰蛋白酶酶解液經(jīng)凝膠過濾SephadexG25Fine分離得到10個洗脫峰，收集各峰

3、，并對Fr6、Fr7、Fr9、Fr10四個分子量較小聚合度不同的肽組分進一步分析。下一步應(yīng)用SuperdexPeptideHR10/30制備柱、HQ-20陰離子交換柱分離純化四個組分。并確定了Fr6、Fr7、Fr9分子量。應(yīng)用各種光譜方法(如：紫外光譜、紅外光譜、NMR等)對其中的Fr10進行了結(jié)構(gòu)分析，證明其為色氨酸。最后，對寡肽及Fr6、Fr7、Fr9進行了抗腫瘤活性篩選，結(jié)果顯示太平洋牡蠣的脫脂蛋白質(zhì)經(jīng)酶解得到的寡肽有較好的抗腫瘤