偏頭痛模型大鼠中影像學(xué)與組織學(xué)相關(guān)性的研究.pdf

1、目的:
　　偏頭痛是一種原發(fā)性頭痛，其發(fā)病機(jī)制尚不清楚?；隗w素的形態(tài)學(xué)分析(VBM)可捕捉大腦結(jié)構(gòu)的微細(xì)改變，對(duì)于參與偏頭痛發(fā)病機(jī)制的大腦結(jié)構(gòu)的揭示起著重要的作用。目前關(guān)于VBM顯示結(jié)構(gòu)改變的組織學(xué)機(jī)制尚不清楚，因此對(duì)于偏頭痛患者VBM顯示的改變結(jié)果需謹(jǐn)慎解釋。本研究擬通過(guò)研究偏頭痛模型大鼠大腦VBM顯示結(jié)構(gòu)改變與組織學(xué)改變的相關(guān)性明確VBM改變的組織學(xué)機(jī)制，同時(shí)進(jìn)一步探索偏頭痛的發(fā)病機(jī)制。
　　方法:
　　1.通過(guò)

2、炎癥湯刺激清醒大鼠硬腦膜建立偏頭痛模型
　　將60只Sprague Dawley大鼠隨機(jī)平均分配到10組:低頻炎癥湯刺激組(10μL炎癥湯，每四天一次，刺激3周)、高頻炎癥湯刺激組(10μL炎癥湯，每天一次，刺激3周)、低頻炎癥湯刺激恢復(fù)組（低頻炎癥湯刺激3周后停止刺激3周）、高頻炎癥湯刺激恢復(fù)組（高頻炎癥湯刺激3周后停止刺激3周）、長(zhǎng)時(shí)間高頻炎癥湯刺激組（高頻炎癥湯刺激6周）以及相應(yīng)對(duì)照組（將10μL炎癥湯替換為10μL生理鹽水

3、）。
　　2.行為學(xué)觀察及機(jī)械痛閾值測(cè)定
　　大鼠行為學(xué)在給藥前錄制15分鐘，給藥后錄制30分鐘，每4天錄制一次。靜止和休息行為時(shí)間通過(guò)EthoVision XT動(dòng)物跟蹤軟件獲得。面部理毛時(shí)間通過(guò)人工計(jì)時(shí)記錄。
　　給藥前用Von-Frey纖維絲測(cè)定大鼠給藥同側(cè)眶周皮膚機(jī)械痛閾值。低頻炎癥湯刺激組與其對(duì)照組每四天測(cè)一次，高頻炎癥湯刺激組與其對(duì)照組隔天一次。
　　3.磁共振數(shù)據(jù)采集以及VBM分析給藥3周、6周后使用

4、7.0T超導(dǎo)磁共振機(jī)給予大鼠行T2核磁結(jié)構(gòu)像掃描（每組6只）。使用spmratIHEP工具包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行圖像預(yù)處理及分析。
　　4.組織學(xué)分析
　　大鼠完成磁共振掃描之后，每組隨機(jī)選取5只進(jìn)行經(jīng)心臟灌注取腦。采用免疫組化染色的方法標(biāo)記感興趣區(qū)域前額葉、中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)(PAG)、腦橋被蓋部和三叉神經(jīng)脊髓核尾部(Sp5C)的相關(guān)指標(biāo)NeuN、GFAP、Ibal、MBP、PLP的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:
　　1.偏頭痛

5、模型大鼠
　　炎癥湯刺激組較相應(yīng)對(duì)照組在給予藥物刺激后大鼠出現(xiàn)更長(zhǎng)的靜止、休息時(shí)間和面部理毛時(shí)間，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　從給藥后第三天開始，高頻炎癥湯刺激組大鼠眶周皮膚機(jī)械痛閾值較其對(duì)照組明顯下降，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　2.VBM結(jié)果以及其與免疫組化染色結(jié)果的相關(guān)性
　　與對(duì)照組相比，低頻炎癥湯刺激組在延髓和腦橋出現(xiàn)白質(zhì)體積增加。高頻炎癥湯刺激組與對(duì)照組相比，白質(zhì)體積增高表現(xiàn)在

6、前額葉、前邊緣葉、海馬和運(yùn)動(dòng)皮層等區(qū)域。高頻炎癥湯刺激恢復(fù)組與對(duì)照組相比，白質(zhì)體積增高表現(xiàn)在基底節(jié)、胼胝體以及海馬等區(qū)域;丘腦、PAG、腦橋等區(qū)域出現(xiàn)灰質(zhì)體積增加，海馬區(qū)域灰質(zhì)體積下降。與對(duì)照組相比，長(zhǎng)時(shí)間高頻炎癥湯刺激組在前額葉、胼胝體、海馬、丘腦等區(qū)域出現(xiàn)白質(zhì)體積增高;灰質(zhì)體積下降區(qū)域表現(xiàn)在胼胝體、基底節(jié)及感覺皮層，同時(shí)下丘腦灰質(zhì)體積增加。白質(zhì)體積的指標(biāo)變化與髓鞘形成及繼發(fā)性炎癥改變?nèi)缧∧z質(zhì)細(xì)胞增生和膠質(zhì)細(xì)胞增生相關(guān)。PLP在反映髓

7、鞘病變較MBP更敏感。
　　結(jié)論:
　　1.VBM可發(fā)現(xiàn)傳統(tǒng)T2加權(quán)像核磁不能發(fā)現(xiàn)的潛在病理改變結(jié)構(gòu)。偏頭痛模型大鼠中存在腦干尤其是三叉神經(jīng)傳導(dǎo)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)異常，同時(shí)大鼠出現(xiàn)的痛覺過(guò)敏可能與前額葉的結(jié)構(gòu)異常相關(guān)。
　　2.VBM結(jié)構(gòu)改變與髓鞘形成及繼發(fā)性炎癥改變相關(guān)。膠質(zhì)細(xì)胞的活化和髓鞘異常與偏頭痛相關(guān)性疼痛的發(fā)病機(jī)制相關(guān)。
　　3.偏頭痛患者VBM結(jié)構(gòu)改變可能是頭痛反復(fù)發(fā)作的結(jié)果，同時(shí)VBM顯示的異常結(jié)構(gòu)在偏頭痛