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文檔簡介
1、血紅蛋白基因能能使低氧條件下細胞的生長和蛋白質(zhì)的合成速度不會受到太大的影響，并且在一定條件下還能促進目的基因的表達。本研究將透明顫菌血紅蛋白基因成熟肽編碼區(qū)序列分別與枯草芽孢桿菌的P43雙啟動子和短小芽孢桿菌堿性蛋白酶啟動子wBp連接，重組成融合基因，然后利用大腸桿菌-枯草芽孢桿菌穿梭載體pSUGv4分別構(gòu)建組成型表達質(zhì)粒pSUP43vgb和pSUwBpvgb。將表達質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)化短小芽孢桿菌Bacillus pumilus UN-31-
2、C-11、枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis WB600和大腸桿菌Escherichia coli BL21(DE3)，經(jīng)SDS-PAGE和CO差異光譜檢測表明融合基因在3種宿主菌中均得到了表達。融合基因的表達使宿主菌模擬通氧充分或者低氧培養(yǎng)條件下均表現(xiàn)出相對于對照菌株的生長優(yōu)勢。在短小芽孢桿菌中，表達質(zhì)粒使重組菌株在低氧條件下的生長量在生長后期超對照菌株20％以上，而且血紅蛋白的表達促進了短小芽孢桿菌蛋白酶基因的表達和分泌
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