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文檔簡介
1、蕨類植物也稱羊齒植物,分類地位介于苔蘚植物和種子植物之間,全世界約有12 000多種。我國有“蕨類王國”之稱,現(xiàn)有2 600多種。廣西蕨類植物十分豐富,有蕨類植物約854種,占全國的32.85%。蕨類植物具有觀賞、食用、藥用和作指示植物等諸多價值。另外,在研究植物的物種起源、進(jìn)化和分類方面也極具科學(xué)價值。自然條件下,蕨類植物主要通過孢子進(jìn)行繁衍,其繁殖過程離不開水,生長地域受限。近年來,隨著自然生態(tài)環(huán)境的破壞以及人們對觀葉、藥用、食用等
2、蕨類植物的需求的增加,這些相應(yīng)種的自然繁殖很難滿足人們的需要。因此研究蕨類植物的組培快繁及其配子體的發(fā)育將對蕨類植物的開發(fā)利用、種質(zhì)保存及種的鑒定、科屬的劃分、蕨類植物的起源、演化、生態(tài)分布等具有重要作用。本文主要由如下兩大部分構(gòu)成: 第一部分研究了具有觀賞價值的紅蓋鱗毛蕨、腎蕨、假鞭葉鐵線蕨、薄葉碎米蕨的組織培養(yǎng)與快速繁殖。按照實驗進(jìn)程,本文的組培快繁研究分為兩個重要環(huán)節(jié),第一是配子體培養(yǎng),第二是孢子體誘導(dǎo)。在研究中都采用成熟
3、孢子為外植體(其中紅蓋鱗毛蕨還采用了無菌苗幼葉),培養(yǎng)溫度為25℃,每天光照12 h,以 MS ( 3% 蔗糖,0.7% 瓊脂,Ph 6.0;下同)為基本培養(yǎng)基,在此基礎(chǔ)上變換MS大量元素濃度、激素(6-BA和NAA)濃度、蔗糖濃度等營養(yǎng)元素的配比,以期找到最佳培養(yǎng)基。在多因素多水平的配方中,引入了國際流行的正交設(shè)計和均勻設(shè)計實驗方法,對整個實驗過程進(jìn)行優(yōu)化處理。結(jié)果表明:紅蓋鱗毛蕨在MS培養(yǎng)基上就取得了良好效果,孢子萌發(fā)率、原葉體增殖
4、速度和幼孢子體形成率都很高;腎蕨孢子在MS~1/8MS上都能良好萌發(fā),增殖以MS為好;假鞭葉鐵線蕨孢子在1/2MS培養(yǎng)基上萌發(fā)效果好,在MS+1%蔗糖上增殖速度高;薄葉碎米蕨孢子在1/2MS培養(yǎng)基上萌發(fā)效果好,在MS+3%蔗糖上增殖速度高。雖然,腎蕨、假鞭葉鐵線蕨和薄葉碎米蕨的配子體在無菌培養(yǎng)基中都很難或不能形成幼孢子體;但是,在常規(guī)培養(yǎng)皿誘導(dǎo)中都取得了很好的效果,上述三種蕨類植物的幼孢子體形成率都可達(dá)90%以上。綜上所述,紅蓋鱗毛蕨的
5、快繁體系可采用完全無菌組培方式;另三種蕨的快繁體系采用配子體組培無菌增殖,然后常規(guī)培養(yǎng)皿誘導(dǎo)的方式。 第二部分研究了紅蓋鱗毛蕨、腎蕨、假鞭葉鐵線蕨、薄葉碎米蕨、四回毛枝蕨從孢子萌發(fā)開始直到幼孢子體形成的整個配子體發(fā)育形態(tài)。無菌培養(yǎng)基MS或1/2MS,溫度25℃,光照12 h/d,輔以常規(guī)水培養(yǎng)為參照。對配子體發(fā)育的各個階段進(jìn)行詳細(xì)的觀察和記錄并用OLYMPUS DP 70拍攝照片。結(jié)果表明:腎蕨孢子左右對稱,單裂縫,赤道側(cè)面觀豆
6、形,極面觀圓球形,孢子萌發(fā)類型為書帶蕨型,原葉體發(fā)育為三叉蕨型,原葉體全身被毛狀體;紅蓋鱗毛蕨孢子左右對稱,具周壁,單裂縫,赤道面觀豆形,極面觀圓形,孢子萌發(fā)類型為書帶蕨型,原葉體發(fā)育為三叉蕨型,原葉體全身被毛狀體;假鞭葉鐵線蕨孢子四面體形, 輻射對稱,孢子極面觀為鈍三角圓形, 赤道面觀為超半圓形,三裂縫,孢子萌發(fā)類型為紫萁型, 原葉體發(fā)育方式為鐵線蕨型,原葉體全身裸露無毛狀體;薄葉碎米蕨孢子成正球形中心對稱,三裂縫,孢子萌發(fā)類型是書帶
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