鱗翅目昆蟲FXPRLamide神經(jīng)肽的組織學(xué)定位及功能研究.pdf

1、以鱗翅目(Lepitoptera)的昆蟲為研究對象,對滯育激素(diapause hormone,DH)-信息素生物合成激活肽(pheromone biosynthesis activating neuropeptide,PBAN)基因的表達(dá)定位、表達(dá)變化及其功能進(jìn)行了研究.在家蠶中,DH已知是誘導(dǎo)胚胎發(fā)育停滯的神經(jīng)肽,但是在其它昆蟲,DH的功能尚不清楚.PBAN的功能是促進(jìn)鱗翅目昆蟲的性信息素的生物合成.DH-PBAN基因編碼五個神經(jīng)

2、肽:DH,PBAN,α-、β-和γ-SGNP.這些神經(jīng)肽都具有相同的C末端:FXPRLamide,所以歸屬于FXPRL家族神經(jīng)肽.根據(jù)cDNA序列,合成棉鈴蟲(Helicoverpa armigera)和家蠶(Bombyxmori)的滯育激素及棉鈴蟲信息素生物合成激活肽,制備抗體,Western-blot和免疫組化方法檢測DH-PBAN基因在蛋白水平上的表達(dá)、分布、合成及釋放;原位雜交方法定位DH-PBAN mRNA在咽下神經(jīng)節(jié)(sub

3、oesophageal ganglion,SG)的3簇神經(jīng)分泌細(xì)胞;酶聯(lián)免疫反應(yīng)(ELISA)檢測體液中DH-PBAN的滴度;生理學(xué)實驗推測了棉鈴蟲DH-PBAN基因可能的新功能.結(jié)果表明,棉鈴蟲從胚胎、幼蟲、蛹到成蟲的整個世代,DH-PBAN基因都在咽下神經(jīng)節(jié)的上顎、下顎和上唇神經(jīng)元中表達(dá),通過心側(cè)體(corpus cardiacum,CC)和末端腹神經(jīng)節(jié)(terminal abdominal ganglion,TAG)釋放.滯育與非

4、滯育個體之間DH-PBAN基因的表達(dá)差異說明這些神經(jīng)肽可能參與昆蟲生長發(fā)育的調(diào)節(jié).腦和SG的摘除及DH-PBAN在thoracic ganglia(TG)中的表達(dá)證實了這種調(diào)節(jié)功能.幼蟲時期DH-PBAN基因產(chǎn)物----FXPRLamide神經(jīng)肽和蛻皮激素的注射可顯著延長齡期,血淋巴中FXPRLamide神經(jīng)肽和蛻皮激素含量的變化說明兩者對六齡幼蟲生長的調(diào)節(jié)作用,且FXPRLamide神經(jīng)肽可能通過調(diào)節(jié)前胸腺蛻皮激素的合成和/或釋放而起