大黃蒽醌類化合物與腎臟OATs及馬兜鈴酸A與腸道外排轉(zhuǎn)運體相互作用研究.pdf

1、腎臟有機陰離子轉(zhuǎn)運體(OATs)表達在腎小管上皮細胞基底側(cè)或頂側(cè)，參與腎小管分泌或重吸收，是腎臟功能的重要組成部分。很多臨床上常用的治療藥物以及很多與疾病相關(guān)的內(nèi)源性化合物能夠與腎臟OATs發(fā)生相互作用。中藥大黃是我國著名的傳統(tǒng)中藥材，大黃中主要的活性成分為大黃蒽醌類化合物，包括大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃酚和大黃素甲醚等。文獻報道大黃酸在動物腎臟組織中的濃度分布顯著高于其他組織器官。而大黃酸在生理條件下以陰離子形式存在，符合OAT

2、s的底物特性，因此推測大黃酸可能與腎臟OATs發(fā)生相互作用。此外，五種大黃蒽醌類化合物結(jié)構(gòu)相似，其他大黃蒽醌類化合物也可能與OATs發(fā)生相互作用。本課題對五種大黃蒽醌類化合物與腎臟OATs的相互作用進行研究，主要就大黃蒽醌類化合物是否為OATs底物或抑制劑;大黃酸在腎臟高濃度分布是否與腎臟表達的OATs相關(guān);大黃蒽醌類化合物與腎臟OATs底物在動物體內(nèi)是否能夠發(fā)生相互作用;大黃蒽醌類化合物與腎臟OATs相互作用是否具有應(yīng)用價值等科學問題

3、進行探討，為大黃臨床合理用藥提供參考。在研究中發(fā)現(xiàn)，腸道外排轉(zhuǎn)運體可能參與腎毒性O(shè)ATs底物馬兜鈴酸A(AAI)的腸道轉(zhuǎn)運。本研究主要內(nèi)容包括：
　　第一部分：五種大黃蒽醌類化合物與hOAT1和hOAT3相互作用。應(yīng)用高表達hOAT1和hOAT3的細胞模型，研究了五種大黃蒽醌類化合物（大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素、大黃酚和大黃素甲醚）與轉(zhuǎn)運體的相互作用。結(jié)果顯示，五種大黃蒽醌類化合物對hOAT1和hOAT3均具有抑制作用，其中大黃酸

4、對hOAT1和hOAT3的抑制作用最強，其次是大黃素和蘆薈大黃素，大黃酚和大黃素甲醚對hOAT1和hOAT3的抑制作用較弱。進一步研究發(fā)現(xiàn)，抑制劑預(yù)孵育能夠增加某些大黃蒽醌類化合物對hOAT1或hOAT3的抑制作用，且抑制作用隨預(yù)孵育時間的延長而增加。細胞積聚實驗結(jié)果顯示，五種大黃蒽醌類化合物均不是hOAT1或hOAT3的底物。
　　第二部分：大黃酸和大黃提取物對呋塞米大鼠藥物動力學影響。為進一步研究大黃蒽醌類化合物在體內(nèi)對腎臟O

5、ATs的抑制作用，我們研究了大黃酸和大黃提取物（單次或多次給藥后）對OATs底物呋塞米在大鼠體內(nèi)藥物動力學的影響。合用大黃酸使呋塞米在大鼠體內(nèi)的AUC(0-t)增加了65％，平均駐留時間顯著增加，清除率和表觀分布容積顯著降低。合用大黃提取物（單次或多次給藥后），使呋塞米的AUC0-t值增加了32％和52％。說明大黃酸和大黃提取物能夠在動物體內(nèi)抑制OATs，與OATs底物合用可能發(fā)生藥物相互作用。
　　第三部分：大黃酸和大黃提取物對

6、AAI及其去甲基代謝物大鼠藥物動力學和組織分布影響。AAI為腎毒性物質(zhì)，也是腎臟OATs的底物。腎臟OATs攝取AAI進入腎臟，介導AAI的腎臟毒性。我們研究了大黃酸和大黃提取物合用AAI，對AAI及其去甲基代謝物(AAIa)在大鼠體內(nèi)的藥物動力學以及組織分布的影響。結(jié)果顯示，合用大黃酸使AAI和AAIa的AUC(0-t)增加了38％和31％。合用大黃提取物對AAI和AAIa的血藥濃度沒有顯著影響。但是合用大黃酸和大黃提取物，均顯著降低

7、AAI在腎臟的分布。在5min、10min和20min時間點，大黃酸使AAI在腎臟組織中濃度分別降低至對照組的50％、42％和58％，大黃提取物使AAI在腎臟組織中濃度分別降低至對照組的63％、58％和68％。
　　第四部分：AAI與腸道外排轉(zhuǎn)運體相互作用。前期研究發(fā)現(xiàn)，AAI在Caco2細胞中雙向轉(zhuǎn)運的外排率為5.8，大于2，說明有外排轉(zhuǎn)運體參與AAI的外排轉(zhuǎn)運。因此在高表達MDR1、MRP2和BCRP的細胞模型中，研究AAI與

8、這三種腸道主要表達的外排轉(zhuǎn)運體之間相互作用。結(jié)果顯示，AAI不是P-gp底物，也不是MRP2底物，而是BCRP的底物。
　　第五部分：研究結(jié)果顯示，五種大黃蒽醌類化合物均為hOAT1和hOAT3的抑制劑，其中大黃酸對hOAT1和hOAT3的抑制作用最強。五種大黃蒽醌類化合物均不是hOAT1或hOAT3的底物，因此不能證明大黃酸在腎臟高濃度分布是否與腎臟表達的OATs相關(guān)。大黃酸和大黃提取物在體內(nèi)能夠與OATs底物呋塞米發(fā)生相互作用