不同亞型人隱孢子蟲(chóng)和微小隱孢子蟲(chóng)生物學(xué)特性研究.pdf

1、目前國(guó)內(nèi)少有的一些研究表明入主要感染人隱孢子蟲(chóng)（Cryptosporidium hominis），但C．hominis群體遺傳結(jié)構(gòu)尚不清楚，從而不能推斷人隱孢子蟲(chóng)病的感染來(lái)源和傳播機(jī)制。本課題對(duì)開(kāi)封地區(qū)人源隱孢子蟲(chóng)分離株以基于SSU rRNA基因的PCR-RFLP方法為主要工具進(jìn)行種類和基因型鑒定、以GP60基因位點(diǎn)進(jìn)行亞型分析，從而解析C．hominis群體遺傳結(jié)構(gòu)，初步總結(jié)出入隱孢子蟲(chóng)病的流行規(guī)律和傳播機(jī)制。并用C． hominis

2、不同亞型分離株感染蒙古沙鼠、新生仔豬和羔羊，觀察其臨床癥狀和病理變化，從而研究不同亞型之間的生物學(xué)差異。同時(shí)對(duì)國(guó)內(nèi)主要C．hominis和微小隱孢子蟲(chóng)(C. parvum)基因亞型進(jìn)行致病性研究，了解國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)上主要隱孢子蟲(chóng)種生物學(xué)特性，以期為隱孢子蟲(chóng)公共衛(wèi)生安全屏障的建立起到有效推動(dòng)作用。
　　 開(kāi)封是國(guó)家精品旅游城市，以其獨(dú)特的旅游資源和深厚的旅游文化，每年接納數(shù)億海內(nèi)外游客，人員流動(dòng)性大，有利于機(jī)會(huì)性人獸共患寄生蟲(chóng)傳播流行。

3、為了解開(kāi)封地區(qū)臨床病人隱孢子蟲(chóng)感染狀況，用飽和蔗糖溶液漂浮法、甲醛-乙酸乙酯-改良抗酸染色法對(duì)該地區(qū)門(mén)診和住院病人6093份糞便樣品進(jìn)行了檢查。結(jié)果檢出隱孢子蟲(chóng)感染率為0.1％，秋季為感染高峰期，6歲以下兒童感染率較高。所有分離株均為C． hominis，．Ib亞型家族占5/6，Ia亞型家族1/6。研究表明開(kāi)封地區(qū)臨床病人隱孢子蟲(chóng)感染率較低，但仍應(yīng)進(jìn)一步開(kāi)展健康教育，普及衛(wèi)生知識(shí)，提高自我保健意識(shí)和自我保健能力，預(yù)防食源性寄生蟲(chóng)病的發(fā)生

4、和流行。
　　 目前國(guó)內(nèi)一些研究表明入主要感染人隱孢子蟲(chóng)(Cryptosporidium hominis)，但已獲取且傳代保存的國(guó)內(nèi)C． hominis分離株較少，C．hominis生物學(xué)特性研究未見(jiàn)報(bào)道。在本試驗(yàn)自感染前第10d起，采用胃導(dǎo)管灌服地塞米松抑制蒙古沙鼠(Meiiones Unguiculataus)免疫力直至排卵囊結(jié)束后14d，對(duì)國(guó)內(nèi)C．hominis Ib亞型分離株進(jìn)行生物學(xué)特性研究。結(jié)果顯示，感染后3d，感染

5、組有卵囊排出，感染后第6d出現(xiàn)高峰期，此后還漸下降直至感染后10或11d排卵囊結(jié)束。感染前后基于18S rRNA和gp60基因分析，表明遺傳學(xué)無(wú)差異。建立了持續(xù)穩(wěn)定的C． hominis Ib亞型分離株嚙齒動(dòng)物模型，為C．hominis卵囊擴(kuò)增和進(jìn)一步研究其生物學(xué)特性等提供了重要的參考依據(jù)。
　　 為了尋求更為經(jīng)濟(jì)有效的C． parvum卵囊保種傳代方法，將19日齡蒙古沙鼠隨機(jī)分成5組，免疫抑制對(duì)照組和感染組采用胃導(dǎo)管灌服地塞米

6、松0.80mg．只-1·2d-1，10d后，感染組沙鼠灌胃接種C． parvum卵囊，對(duì)排卵囊規(guī)律，臨床表現(xiàn)及組織學(xué)和超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了觀察。結(jié)果感染后第2d有卵囊排除，顯露期OPG值近似于犢牛實(shí)驗(yàn)，且持續(xù)時(shí)間較犢牛感染長(zhǎng)，為C． parvum卵囊保種傳代提供了更為經(jīng)濟(jì)的實(shí)驗(yàn)方法。
　　 為了初步確定人隱孢子蟲(chóng)同一亞型家族內(nèi)不同亞型是否存在生物學(xué)表型差異，用分離自開(kāi)封地區(qū)某醫(yī)院的C． hominis分離株ZZH-1(IbA20G2)

7、和WJH-35(IbA19G2)感染新斷奶蒙古沙鼠，3日齡羔羊和仔豬；通過(guò)比較感染后動(dòng)物的臨床癥狀、蟲(chóng)體寄生部位、寄生量和病理變化并測(cè)定感染動(dòng)物的排卵囊規(guī)律、體重變化等一系列指標(biāo)來(lái)初步確證不同亞型人隱孢子蟲(chóng)致病性差異。研究結(jié)果顯示，不同亞型人隱孢子蟲(chóng)的致病作用存在一定差異，為下一步隱孢子蟲(chóng)毒理的深入研究奠定了理論基礎(chǔ)。
　　 為了研究人隱孢子蟲(chóng)（Cryptosporidium hominis IbA19G2）和微小隱孢子蟲(chóng)(C.