鹿源隱孢子蟲和畢氏腸微孢子蟲分子遺傳特征鑒定及其多態(tài)性分析.pdf

1、隱孢子蟲(Cryptosporidium)與畢氏腸微孢子蟲(Enterocytozoon bieneusi)均為重要的人獸共患機(jī)會(huì)性致病病原，多寄生于哺乳動(dòng)物腸道并主要導(dǎo)致宿主產(chǎn)生腹瀉癥狀。免疫力正常者感染此類病原體多產(chǎn)生自限性腹瀉，免疫力低下或缺失者則會(huì)造成嚴(yán)重的脫水性腹瀉,甚至危及生命。這些病原在世界范圍內(nèi)廣泛分布，可通過糞-口途徑、直接接觸或食入污染的食物或飲水進(jìn)行傳播。
　　我國(guó)是世界上馴養(yǎng)梅花鹿最多的國(guó)家，其梅花鹿鹿茸產(chǎn)

2、量及質(zhì)量居世界第一。鹿及其副產(chǎn)品均具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，養(yǎng)鹿業(yè)已成為我國(guó)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物飼養(yǎng)中的重要產(chǎn)業(yè)之一。本研究從流行病學(xué)調(diào)查、種類/基因型鑒定、亞型分型、遺傳多態(tài)性分析4個(gè)層次對(duì)河南省和吉林省共7個(gè)地區(qū)進(jìn)行了鹿源隱孢子蟲和畢氏腸微孢子蟲分子流行病學(xué)研究。
　　本次研究共采集梅花鹿、馬鹿、麋鹿糞便樣品662份，采用飽和蔗糖溶液漂浮法檢查共發(fā)現(xiàn)6種腸道寄生蟲，分別為球蟲、隱孢子蟲、賈第蟲、圓線蟲、鞭蟲和絳蟲，寄生蟲總感染率為26.89％，

3、其中球蟲和隱孢子蟲為優(yōu)勢(shì)感染蟲種，1歲以下的鹿感染率最高，尤其是1-2月齡的仔鹿。
　　對(duì)45份隱孢子蟲陽性樣品進(jìn)行基于SSU rRNA基因位點(diǎn)的PCR擴(kuò)增以及序列比對(duì)、同源性分析、分子進(jìn)化樹構(gòu)建，共鑒定出5個(gè)隱孢子蟲蟲種和1個(gè)基因型，包括11個(gè)C.parvum(24.44%)、5個(gè)C.andersoni(11.11%)、3個(gè)C.ubiquitum(6.67%)、1個(gè)C.muris(2.22%)、1個(gè)C.suis(2.22%)和2

4、4個(gè)Cryptosporidium deer genotype(53.33%)。其中，Cryptosporidium deer genotype為優(yōu)勢(shì)感染基因型，C.andersoni、C.muris和C.suis為首次在鹿體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的蟲種。
　　鹿源C.parvum和C.ubiquitum亞型分型采用基于gp60基因的DNA序列分析。11個(gè)C.parvum分離株被成功分型5個(gè)，4個(gè)為ⅡaA15G2R2，1個(gè)為ⅡdA19G1；3個(gè)C

5、.ubiquitum分離株均屬于Ⅷasubtype2。ⅡaA15G2R2和IIdA19G1為首次在鹿體內(nèi)鑒定的基因亞型。
　　基于ITS基因，共鑒定235份畢氏腸微孢子蟲陽性樣品，總感染率為35.50%。發(fā)現(xiàn)26個(gè)基因型，其中BEB6、HLJD-Ⅰ、HLJD-Ⅳ、COS-Ⅰ、COS-Ⅱ、EbpA、EbpC和D為已知基因型，BEB6為優(yōu)勢(shì)基因型，EbpC和D為人獸共患基因型；18份鑒定為新基因型，命名為New1-18，均分布在組1和