黑莓籽和赤芍血栓作用機制研究.pdf

1、本論文由三章組成。第一章綜述血栓形成機理及抗血栓藥物的研究進展。第二章論述黑莓籽的體外凝血四項指標的研究、纖溶活性和尿激酶纖溶抑制活性研究以及體內(nèi)的抗血栓作用及其作用機制研究。第三章論述赤芍及其活性成分的抗血栓作用及作用機制研究。
　　第一章、血栓形成及抗血栓藥物研究進展
　　綜述血栓形成的機理：(1)心血管功能的損傷；(2)血小板的粘附聚集和凝血系統(tǒng)的激活；(3)血流狀態(tài)的改變，如血流緩慢或停滯、渦流的形成等。介紹抗血栓藥

2、物的研究進展，包括抗凝血藥、抗血小板聚集藥和溶栓藥。
　　第二章、黑莓籽抗血栓作用機制研究
　　本章分為四節(jié)。
　　第一節(jié)，首次采用體外活化部分凝血活酶時間(activated partial thromboplastin time,APTT)、凝血酶原時間(prothrombin time,PT)、凝血酶時間(thrombin time,TT)、纖維蛋白原(fibrinogen,FIB)對黑莓籽進行體外凝血活性研究。

3、結果顯示，黑莓籽乙醇總浸膏、石油醚部位、正丁醇部位以及分離得到的8個化合物(十六烷酸、1α,2α,3β,19α-四羥基-12-烯-28-烏蘇酸、委陵菜酸、熊果酸、9(Z)-octadecenamide、suavissimoside R1、pomolic acid-28-O-β-D-glucopyranosyl ester和3,5,7,2',5'-pentahydroxy-flavan)均具有良好的體外抗凝血活性。而黑莓籽乙酸乙酯部位以及

4、薔薇酸和齊墩果酸具有一定的體外促凝血活性。
　　第二節(jié)，通過建立纖溶途徑抑制模型，采用纖維蛋白原-瓊脂糖平板法首次對黑莓籽提取物及分離得到的10個化合物的體外纖溶活性和尿激酶激活的纖溶途徑抑制活性進行研究。結果顯示，黑莓籽乙醇總浸膏和正丁醇部位具有一定的體外纖溶活性；黑莓籽乙醇總浸膏、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位以及10個化合物均對尿激酶激活的纖溶途徑有抑制作用。
　　第三節(jié)，采用皮下注射鹽酸腎上腺素結合冰水浴的方法

5、制備大鼠的急性血瘀模型。通過大鼠急性血瘀模型首次對黑莓籽的體內(nèi)抗血栓活性及抗血栓作用機制進行研究。試驗結果表明，黑莓籽乙醇總浸膏、石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位均具有良好的抗血栓活性。且它們降低急性血瘀模型大鼠全血粘度(whole blood viscosity,WBV)可能是通過降低紅細胞壓積(packedcellvolume,PCV)，降低血漿粘度(plasma viscosity,PV)可能是通過降低紅細胞沉降率(eryth

6、rocytesedimentationrate,ESR)；通過內(nèi)源性凝血途徑、外源性凝血途徑、凝血共同途徑以及降低血漿中纖維蛋白原的含量來抑制血液的凝固，從而達到抗血栓的效果；通過降低內(nèi)皮素(endothelin-1,ET-1)和升高一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的含量來抑制血栓的形成；黑莓籽乙醇總浸膏、石油醚部位、乙酸乙酯部位通過降低急性血瘀模型大鼠血清中血栓素 B2(Th

7、romboxane B2,TXB2)和升高6-酮-前列腺素F1α(6-keto-prostaglandinF1α,6-Keto-PGF1α)的含量來抑制血栓的形成，黑莓籽正丁醇部位通過降低急性血瘀模型大鼠血清中TXB2的含量來抑制血栓的形成，且黑莓籽提取物對6-Keto-PGF1α/ TXB2的平衡具有良好的調節(jié)作用。
　　第四節(jié)，采用大鼠急性血瘀模型首次對熊果酸的體內(nèi)抗血栓活性及抗血栓作用機制進行研究。試驗結果表明，熊果酸具有良

8、好的抗血栓活性，且熊果酸降低急性血瘀模型大鼠WBV可能是通過降低PCV，降低PV可能是通過降低ESR；通過內(nèi)源性凝血途徑、外源性凝血途徑、凝血共同途徑以及降低血漿中纖維蛋白原的含量來抑制血液的凝固，從而達到抗血栓的效果；通過降低ET-1的含量來抑制血栓的形成；通過降低TXB2和升高6-Keto-PGF1α以及維持6-Keto-PGF1α/ TXB2的動態(tài)平衡來抑制血栓的形成且熊果酸是黑莓籽抗血栓的活性成分之一。
　　第三章、赤芍抗

9、血栓作用機制研究
　　本章分為兩節(jié)。
　　第一節(jié)，采用急性血瘀模型首次對赤芍乙醇總浸膏、乙酸乙酯部位和正丁醇部位進行體內(nèi)抗血栓作用及其作用機制研究。試驗結果表明：赤芍乙醇總浸膏、乙酸乙酯部位和正丁醇部位均具有良好的抗血栓活性，且它們降低急性血瘀模型大鼠WBV可能是通過降低PCV，降低PV可能是通過降低ESR；通過內(nèi)源性凝血途徑、外源性凝血途徑、凝血共同途徑以及降低血漿中纖維蛋白原的含量來抑制血液的凝固，從而達到抗血栓的效果；

10、赤芍乙醇總浸膏和乙酸乙酯部位通過降低ET-1和升高eNOS的含量來抑制血栓的形成，正丁醇部位通過升高eNOS的含量來抑制血栓的形成；赤芍乙醇總浸膏和正丁醇部位通過降低TXB2和升高6-Keto-PGF1α來抑制血栓的形成，乙酸乙酯部位通過降低TXB2的含量來抑制血栓的形成，且它們對6-Keto-PGF1α/TXB2均有良好的平衡作用。
　　第二節(jié)，采用大鼠的急性血瘀模型首次對從赤芍中分離得到的4個化合物(原兒茶酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥

11、苷和1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖)進行體內(nèi)抗血栓作用及其作用機制研究。試驗結果表明，原兒茶酸、芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷和1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖均有良好的抗血栓活性，且它們降低急性血瘀模型大鼠WBV可能是通過降低PCV，降低PV可能是通過降低ESR；通過內(nèi)源性凝血途徑、外源性凝血途徑、凝血共同途徑以及降低血漿中纖維蛋白原的含量來抑制血液的凝固，從而達到抗血栓的效果；芍藥苷和芍藥內(nèi)酯苷通過降低ET-1和升高eNOS的

12、含量來抑制血栓的形成，原兒茶酸和1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖通過升高eNOS的含量來抑制血栓的形成。芍藥內(nèi)酯苷和1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖通過降低TXB2和升高6-Keto-PGF1α來抑制血栓的形成，原兒茶酸和芍藥苷通過升高6-Keto-PGF1α來抑制血栓的形成；且它們對6-Keto-PGF1α/TXB2均有良好的平衡作用。原兒茶酸，芍藥內(nèi)酯苷、芍藥苷和1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖是赤芍抗血栓的