納豆激酶抗血栓作用機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 研究納豆激酶抗血栓作用的機(jī)制。 方法： 以腎上腺素加冰浴制備大鼠急性血瘀模型，觀(guān)察納豆激酶對(duì)大鼠血液流變學(xué)的影響；分別采用ADP、凝血酶和花生四烯酸誘導(dǎo)大鼠血小板聚集，用比濁法測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)的聚集率及最大聚集率；采用Fluo-3/AM鈣離子熒光指示劑，流式細(xì)胞儀測(cè)定納豆激酶對(duì)凝血酶誘導(dǎo)的大鼠血小板胞漿游離鈣離子濃度的影響；放免法測(cè)定血漿TXB2、6-Keto-PGF1α及ET-1的含量，硝酸還原酶法測(cè)定血

2、漿NO含量，酶標(biāo)法測(cè)定人血漿GMP-140和vWF的含量；通過(guò)Real Time PCR方法觀(guān)察納豆激酶對(duì)大鼠主動(dòng)脈t-PA、PAI-1及UK基因表達(dá)的影響。 結(jié)果： 納豆激酶能明顯降低血瘀模型大鼠的全血低、中、高切粘度，血漿粘度。紅細(xì)胞壓積，纖維蛋白原，紅細(xì)胞聚集指數(shù)及電泳指數(shù)；明顯抑制ADP、凝血酶、花生四烯酸誘導(dǎo)的血小板聚集，其ED50分別為1431.9IU/kg、1055.3 IU/kg和1390.8 IU/kg

3、；納豆激酶1000~2000IU/kg能顯著抑制凝血酶誘導(dǎo)的血小板胞漿游離鈣離子濃度的升高；降低血漿TXB2含量(P<0.05或P<0.01)，升高6-Keto-PGF1α含量(P<0.05)，使TXB2/6-Keto-PGF1α比值明顯降低(P<0.05或P<0.01);降低血漿ET-1 含量(P<0.05或P<0.01)，增加NO含量(P<0.05或P<0.01)，明顯降低ET-1/NO比值(P<0.01)；在體外，納豆激酶40IU

4、/mL~80IU/mL作用下能明顯降低人血漿GMP-140和vWF含量(P<0.05或P<0.01)；納豆激酶1000~2000IU/kg可明顯增加t-PA mRNA和UKmRNA的表達(dá)(P<0.05或P<0.01)，但對(duì)PAI-1mRNA的表達(dá)無(wú)明顯性影響(P>0.05)。 結(jié)論： 納豆激酶抗血栓作用機(jī)制可能與改善血液流變學(xué)，抑制血小板聚集，包括抑制血小板胞漿游離鈣離子濃度，降低TXB2和ET-1含量.升高6-Keto