蒙山九州蟲草的化學(xué)成分和生物活性物質(zhì)的研究.pdf

1、蟲草屬[Cordyceps(Fr.)Link]真菌是一大類形態(tài)特殊的昆蟲病原真菌，僅清水大典就已記載316種。亦有報(bào)道，蟲草屬真菌迄今有記載達(dá)350余種。絕大多數(shù)為蟲生真菌，在我國(guó)分布有70多種，是藥用真菌的重要來(lái)源，以我國(guó)傳統(tǒng)名貴藥材一冬蟲夏草最負(fù)盛名。但天然資源已告枯竭。我們?cè)谘芯慷x夏草換代產(chǎn)品的過(guò)程中，于1996年在山東蒙山發(fā)現(xiàn)了一種寄主為豆天蛾(ClanisbilineataWalker)幼蟲的野生蟲草，經(jīng)中國(guó)科學(xué)院微生物研究

2、所郭英蘭先生鑒定為蒙山九州蟲草(Cordyceps kyushuensis Kobayasi)(以下簡(jiǎn)稱蒙山蟲草)，無(wú)性型為九州輪枝霉菌(skyushuensis Verficillium Kyushue)，為一新種。經(jīng)幾年的努力，現(xiàn)已實(shí)現(xiàn)了蒙山蟲草的人工小試栽培，為產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。因此，有必要對(duì)蒙山蟲草的藥用價(jià)值及其作用機(jī)理進(jìn)行探討，這將為新藥源、新藥材及有關(guān)創(chuàng)新性藥物的發(fā)現(xiàn)與開(kāi)發(fā)提供可能與指導(dǎo)。 本論文以蒙山蟲草為材料

3、，運(yùn)用藥物化學(xué)、分析化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)等綜合技術(shù)，從藥物作用的物質(zhì)基礎(chǔ)—化學(xué)成分的研究入手，建立國(guó)內(nèi)外尚無(wú)報(bào)道的蒙山蟲草的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，進(jìn)而探討它的藥效作用與藥用價(jià)值。 主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下： ①蒙山蟲草子座和菌絲體干粉中水分含量與蛹蟲草子座和冬蟲夏草菌絲體干粉中水分含量相近，分別為5.02％、5.44％、5.81％和5.66％；灰分的含量相差略大，分別為2.95％、7.46％、3.48％和4.94％。 蒙

4、山蟲草子座和菌絲體的蛋白質(zhì)含量分別為16.23％和18.55％，均低于蛹蟲草子座和冬蟲夏草菌絲體的19.62[％]和49.34％?？偺堑暮恳跃胖菹x草子座最高，為32.58％，其菌絲體的總糖含量為20.47％略低于蛹蟲草子座的24.90％，均高于冬蟲夏草菌絲體的10.28％。由此可見(jiàn)，蒙山蟲草多糖含量高，使其與其它蟲草(包括冬蟲夏草)在生物活性方面具有可比性。蒙山蟲草子座的粗脂肪含量為8.O％，略低于蛹蟲草子座的10.5％，蒙山蟲草菌絲

5、體的粗脂肪含量為13.0[％]，明顯高于冬蟲夏草菌絲體的8.1％。而粗纖維的含量四者大體相當(dāng)，分別為2.9％、3.2％、4.7％和2.7％。 ②蒙山蟲草菌絲體和子座中含有豐富的甘露醇，在干菌粉中含量分別為10.84％和6.53％，冬蟲夏草菌絲體和蛹蟲草子座中甘露醇的含量分別為6.32％和7.80％。 ③測(cè)定結(jié)果表明蒙山蟲草菌絲體含有16種氨基酸，不含色氨酸和絲氨酸，子座含有18種氨基酸，其氨基酸種類比菌絲體多，兩者均以

6、谷氨酸含量最高，菌絲體的必需氨基酸的含量高于子座的，分別為2.99％和2.38％，菌絲體必需氨基酸占氨基酸總量的66.93[％]，遠(yuǎn)高于子座的34.48[％]，而多數(shù)氨基酸的含量也以菌絲體略高，這些可能與菌絲體培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)豐富有關(guān)，蟲草菌營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)階段氨基酸比生殖生長(zhǎng)階段高應(yīng)是正?，F(xiàn)象。 ④運(yùn)用毛細(xì)管電泳，首次確定了蒙山蟲草的發(fā)酵液多糖和菌絲體多糖水解組分。多糖水解組分主要含有葡萄糖、甘露糖和半乳糖，另外還含有少量阿拉伯糖。其中含

7、量高的葡萄糖、甘露糖和半乳糖的比例分別為：發(fā)酵液，葡萄糖：甘露糖：半乳糖=1：1.08：3.72；菌絲體，葡萄糖：甘露糖：半乳糖=1：0.72：0.99。 ⑤應(yīng)用反相高效液相色譜系統(tǒng)測(cè)定蒙山蟲草中的5'-核苷酸。在優(yōu)化的色譜條件下對(duì)樣品中六種5'-核苷酸進(jìn)行分離，然后用紫外檢測(cè)器對(duì)各個(gè)色譜峰進(jìn)行分析鑒別，并用外標(biāo)法定量得到準(zhǔn)確可靠的定性定量分析結(jié)果。蒙山蟲草中含有5'-UMP、5'-GMP、5'-IMP和5'-AMP四種核苷酸

8、，含量分別為0.4975、0.0133、0.9832和0.0383gg/rag。 ⑥用超臨界CO<,2>萃取技術(shù)提取蒙山蟲草子座揮發(fā)油，共分離出50種化合物，鑒定了其中的44種。已鑒定化合物組分占總餾出組分的88％，占色譜總餾出峰面積的98.2％。在子座揮發(fā)油已鑒定的組分中，含量最高的組分是亞油酸，相對(duì)含量58.44％，其次為棕櫚酸，相對(duì)含量20.69％。相對(duì)含量較高的還有油酸(6.82％)、硬脂酸(3.36％)、十七烷酸即珍珠