腎缺血再灌注后腦血管對(duì)血管緊張素Ⅱ反應(yīng)增強(qiáng)的作用機(jī)制研究.pdf

1、目的:急性腎損傷(Acute kidney injury,AKI)是臨床上常見(jiàn)的并發(fā)癥，具有高發(fā)病率和死亡率的特點(diǎn)。近年來(lái)研究揭示了AKI引發(fā)的多器官功能衰竭是其死亡率高居不下的重要原因。本研究目的是探究AKI小鼠腦血管對(duì)AngⅡ反應(yīng)性變化以及成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2(fibroblast growth factor2，F(xiàn)GF2)在這一過(guò)程中的作用機(jī)制。
　　方法:本實(shí)驗(yàn)用雄性C57BL/6小鼠雙腎動(dòng)脈夾閉30min后恢復(fù)血流灌注24

2、h構(gòu)建急性腎損傷模型，并在復(fù)灌第20h給予成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(fibroblast growth factor receptor，F(xiàn)GFR)1/2/3抑制劑BGJ398(10mg/kg)進(jìn)行灌胃處理。實(shí)驗(yàn)分為三組:假手術(shù)組（Sham組）、急性腎損傷組（AKI組）以及急性腎損傷并BGJ398治療組（AKI+BGJ398組）。缺血復(fù)灌24h后，采用眼球球后取血，檢測(cè)血清肌酐和血尿素氮水平，并取腎臟組織固定切片進(jìn)行蘇木精-伊紅染色后觀察腎

3、臟病理變化。分離腦基底動(dòng)脈和腦后交通動(dòng)脈，運(yùn)用多通道血管張力測(cè)定系統(tǒng)(DMT)檢測(cè)腦血管張力，研究腦血管對(duì)AngⅡ等血管活性藥物的反應(yīng)和張力變化。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)腎、腦血管組織的FGF2、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(FGFBP1)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(FGFR)、血管緊張素受體(AT1R，AT2R)、胞內(nèi)信號(hào)分子PLCγ和PLCβ的mRNA水平變化。
　　結(jié)果:本研究結(jié)果表明，AKI條件下，腦血管對(duì)AngⅡ收縮

4、性反應(yīng)特異性增強(qiáng)，體外孵育FGF2和FGFBP1可以進(jìn)一步增強(qiáng)這種反應(yīng)。分別在在體和離體條件下給予FGFR下游特異的酪氨酸激酶抑制劑能有效抑制這種腦血管AngⅡ收縮反應(yīng)。AKI組與Sham組相比，其血清中FGF2mRNA水平明顯升高。Real-time PCR結(jié)果證實(shí)了腦血管中FGFR和部分胞內(nèi)信號(hào)通路PLC亞型mRNA水平升高。
　　結(jié)論:FGF2增強(qiáng)AKI的小鼠腦血管AngⅡ反應(yīng)性，這種作用是通過(guò)FGFR和酪氨酸激酶通路PLC