藥物靶向抑制黏著斑激酶對心肌梗死后纖維化的影響和機(jī)制的研究.pdf

1、文章分為以下部分:
　　第一部分:黏著斑激酶調(diào)控缺氧誘導(dǎo)的心臟成纖維細(xì)胞分化
　　心肌梗死是臨床上常見的急危重癥，發(fā)病率逐年增加，針對心肌梗死心室重構(gòu)的研究，一直是心血管病研究領(lǐng)域的重點(diǎn)方向。心肌梗死后的纖維化，不僅在梗死區(qū)發(fā)生，在梗死區(qū)交界和非梗死區(qū)同樣會出現(xiàn)修復(fù)性和反應(yīng)性的纖維化。心肌梗死后的纖維化一定程度上對于梗死區(qū)修復(fù)，心功能恢復(fù)是有益的，但持續(xù)的病理性的纖維化可增加心室僵硬度，降低順應(yīng)性，最終出現(xiàn)心功能不全。

2、>　　近年來，越來越多的文獻(xiàn)報道認(rèn)為FAK在纖維化疾病（如皮膚纖維化、腎纖維化、肌肉纖維化、肺纖維化與肝纖維化等）中起著重要的作用;我們課題組既往的研究證實(shí)了FAK參與了心肌梗死后纖維化的調(diào)控過程，但是對于FAK在不良心室重構(gòu)和心梗后長期心功能影響方面卻仍不明確，因此我們擬提取原代的乳鼠心臟成纖維細(xì)胞，培養(yǎng)至第三代時模擬缺血缺氧條件下刺激，在細(xì)胞水平探索FAK在缺血缺氧誘導(dǎo)的心臟成纖維細(xì)胞的激活和表型轉(zhuǎn)化、增殖遷移以及細(xì)胞外基質(zhì)合成方面

3、的作用和影響;我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)缺血缺氧誘導(dǎo)能增加FAK的磷酸化的表達(dá)，F(xiàn)AK與缺血缺氧誘導(dǎo)的成纖維細(xì)胞的激活和表型轉(zhuǎn)化密切相關(guān)，且這種關(guān)系呈現(xiàn)時間和劑量依賴的特點(diǎn);藥物抑制FAK能夠明顯抑制FAK調(diào)控的成纖維細(xì)胞的激活和表型轉(zhuǎn)化;藥物干預(yù)FAK能夠減少細(xì)胞外基質(zhì)的合成;藥物靶向抑制FAK能夠降低缺血缺氧誘導(dǎo)的成纖維細(xì)胞的增殖和遷移;FAK下游涉及纖維化的兩條信號通路:PI3K/AKT信號通路，ERK1/2信號通路均參與到了上述過程，此

4、過程同時有LOX的參與。
　　綜合以上所述，我們在細(xì)胞水平首次較為系統(tǒng)地闡述FAK在缺血缺氧環(huán)境下成纖維細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化、增殖遷移以及細(xì)胞外基質(zhì)合成中的作用與機(jī)制，為心肌纖維化的治療提供了新的思路和方法。
　　第二部分:藥物靶向抑制黏著斑激酶對小鼠心肌梗死后不良心室重構(gòu)及心功能的影響
　　在正常的情況下，細(xì)胞外基質(zhì)的合成和降解維持在動態(tài)平衡的過程中，且主要受基質(zhì)金屬蛋白酶和基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑的調(diào)節(jié);但是在心臟受到損傷時，

5、細(xì)胞外基質(zhì)的合成和降解的動態(tài)平衡被打破，導(dǎo)致間質(zhì)中大量的膠原沉積，最終出現(xiàn)纖維化。過量的細(xì)胞外間質(zhì)的沉積增加心室僵硬度，誘發(fā)心律失常，導(dǎo)致心室收縮舒張功能障礙，最終出現(xiàn)心衰。心肌梗死后的纖維化過程可以大體分為兩個過程:反應(yīng)性纖維化和修復(fù)性纖維化，修復(fù)性纖維化常在心肌梗死后缺血缺氧導(dǎo)致心肌細(xì)胞大量壞死凋亡的情況下發(fā)生，對于維持心臟結(jié)構(gòu)功能的完整性至關(guān)重要，隨著時間的延長，在梗死區(qū)以及梗死區(qū)以遠(yuǎn)的部位會出現(xiàn)反應(yīng)性的纖維化，反應(yīng)性纖維化常伴隨

6、著梗死區(qū)局部炎癥反應(yīng)而出現(xiàn)，以間質(zhì)外和血管周圍大量的細(xì)胞外基質(zhì)的過度沉積為主要特征，梗死區(qū)以遠(yuǎn)纖維化的程度和水平與心肌梗死后的遠(yuǎn)期預(yù)后密切相關(guān)。
　　我們在第一部分細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究中已經(jīng)證實(shí)了FAK參與調(diào)控缺血缺氧條件下成纖維細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化及細(xì)胞外基質(zhì)的合成，基于此，我們擬進(jìn)一步開展在體實(shí)驗(yàn)，通過構(gòu)建CD1小鼠冠狀動脈前降支結(jié)扎的心肌梗死動物模型，術(shù)后持續(xù)給予藥物干預(yù)，在預(yù)設(shè)時間點(diǎn)評估心功能，取材后進(jìn)行進(jìn)一步的病理學(xué)和分子生物學(xué)檢測，觀

7、察藥物干預(yù)黏著斑激酶對小鼠心肌梗死后心室重構(gòu)及心功能的影響。通過探索新型的給藥方式，摸索合適的藥物溶解方案，在持續(xù)三個月的皮下埋置滲透壓泵給藥的過程中，記錄小鼠的生存狀態(tài)，證實(shí)了皮下給藥的安全性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，通過術(shù)后3個月的連續(xù)用藥，藥物干預(yù)抑制體內(nèi)FAK磷酸化表達(dá)，應(yīng)用藥物靶向抑制FAK后能夠改善心肌梗死后間質(zhì)纖維化，這種趨勢在梗死區(qū)交界以及非梗死區(qū)尤為明顯，血管周圍纖維化同樣得到了改善，說明藥物抑制FAK能夠抑制心肌梗死后梗死區(qū)交