RGC32基因在心肌梗死后心肌纖維化過程中的作用.pdf

1、心肌梗死(myocardialinfarction，MI)是因冠狀動脈或其分支狹窄或者阻塞而引起的缺血性心肌病。心肌組織持續(xù)性缺血缺氧引起局部心肌細胞變性而喪失功能，殘存的心肌細胞發(fā)生代償性肥大，心室腔擴大，梗死區(qū)室壁變薄，可導致心肌纖維化和左心室重構，最終可能導致心力衰竭。心肌纖維化（myocardialfibrosis，MF）是多種心臟心血管疾病過程中較普遍的病理過程，是心肌梗死后左心室重構的關鍵。此外，由于心肌組織持續(xù)性缺血缺氧可

2、引起局部心肌細胞變性、壞死或者凋亡，并伴隨著各種炎性細胞的浸潤。同時，成纖維細胞被激活、增殖并轉(zhuǎn)化為肌成纖維細胞，Ⅰ/Ⅲ型膠原的比例失調(diào)，心肌的收縮和舒張功能發(fā)生障礙，引起心肌纖維化、左心室重構等，最終可能導致心力衰竭，嚴重威脅著人類的健康和生命。
　　RGC32(Responsegenetocomplement-32)基因是重要的補體應答基因，在胎盤、胰腺、腎臟、骨骼肌、肝臟等正常組織中表達比較高，在心臟、腦組織中次之，而肺組織

3、細胞中表達較少。RGC32基因在補體介導的炎癥反應、細胞周期調(diào)控、腫瘤轉(zhuǎn)移、組織細胞的增殖分化以及纖維化過程中起著非常重要的作用。因此，本研究用實驗室現(xiàn)有的RGC32基因敲除小鼠和相關技術平臺，復制了小鼠心肌梗死模型，以探索RGC32基因在心肌梗死后心肌纖維化過程中的作用。
　　實驗證實了結(jié)扎左冠狀動脈前降支能造成小鼠心肌梗死，本研究應用組織病理學、熒光定量和心電圖檢測等實驗技術，比較心肌梗死前后各項指標的變化，證實我們成功復制了

4、小鼠心肌梗死模型。
　　本研究用1％TTC染色，發(fā)現(xiàn)野生型小鼠在手術后心肌梗死的面積大于RGC32基因敲除小鼠;利用TUNEL染色法和流式細胞技術，發(fā)現(xiàn)RGC32基因敲除小鼠在心肌梗死手術后和體外誘導的條件下，其心肌細胞凋亡明顯減少。
　　運用免疫組織化學和Masson'sTrichrome等染色方法，發(fā)現(xiàn)RGC32基因敲除小鼠在心肌梗死后不同時間點分泌的膠原減少;用Westernblot的方法檢測RGC32基因敲除小鼠在心