絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥腎陽(yáng)虛證與LTBP1的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:
　　探討絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥腎陽(yáng)虛證與LTBP1的相關(guān)性，為研究絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥腎陽(yáng)虛證的證候基因組學(xué)提供參考。
　　方法:
　　選擇福州地區(qū)絕經(jīng)后婦女受試者，通過(guò)問(wèn)卷調(diào)查、雙能X線骨密度檢測(cè)及中醫(yī)辨證分型，分為PMOP腎陰虛證組（32例）、PMOP腎陽(yáng)虛組(25例)、對(duì)照組(32例)。分別抽取靜脈血，分離白細(xì)胞，用Trizol一步法提取總RNA，檢測(cè)RNA質(zhì)量后，將樣品RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。將各組的目的基因(L

2、TBP1)和內(nèi)參基因(GAPDH)進(jìn)行RT-PCR反應(yīng)，繪制梯度稀釋DNA標(biāo)準(zhǔn)曲線，將每個(gè)樣品的LTBP1的濃度除以GAPDH的濃度，即為此樣品此基因校正后的相對(duì)濃度。采用Western-blot技術(shù)檢測(cè)PMOP腎陽(yáng)虛證組（25例）、對(duì)照組（25例）LTBP1蛋白表達(dá)。最后，SPSS20.0統(tǒng)計(jì)，比較各組LTBP1表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　?、俑鹘M的年齡、初潮年齡、絕經(jīng)年齡、BMI無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，LTBP1校正后的mRNA相對(duì)

3、濃度分別為:PMOP腎陰虛證組:0.055±0.060;PMOP腎陽(yáng)虛證組:0.010±0.011;對(duì)照組:0.027±0.026;②PMOP腎陽(yáng)虛證組與對(duì)照組比較，PMOP腎陽(yáng)虛證組與對(duì)照組LTBP1的mRNA表達(dá)水平存在明顯差異(P=0.004)，且表達(dá)水平低于對(duì)照組;③PMOP腎陰虛證組與對(duì)照組LTBP1的mRNA表達(dá)水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.099);④PMOP腎陰虛證組與PMOP腎陽(yáng)虛證組LTBP1的mRNA表達(dá)水平存在統(tǒng)計(jì)學(xué)

4、差異(P=0.001);⑤對(duì)照組LTBP1的灰度值:0.687±0.592，PMOP腎陽(yáng)證組:0.362±0.289，PMOP腎陽(yáng)虛證組與對(duì)照組比較，PMOP腎陽(yáng)虛證組LTBP1蛋白表達(dá)水平明顯低于對(duì)照組（Wilcoxon秩和檢驗(yàn)，Z=-2.202，P=0.028），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　PMOP腎陽(yáng)虛證組與對(duì)照組相比，LTBP1表達(dá)水平顯著下調(diào)(P＜0.01)，這與前期課題中基因芯片的檢測(cè)結(jié)果是相同的，進(jìn)一步