十字花科根腫病室內(nèi)接種標(biāo)準(zhǔn)化研究.pdf

1、十字花科根腫病是一種世界性的重要病害，由活體寄生性的蕓苔根腫菌（Plasmodiophora brassicae Woronin）引致。近年來(lái)根腫病發(fā)生有加重的趨勢(shì)，防治難度也不斷加大。利用抗性品種是防治根腫病的一種有效手段，但抗性品種的選育和抗性評(píng)價(jià)均涉及到室內(nèi)人工接種及病害分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。鑒于國(guó)內(nèi)外目前在室內(nèi)接種技術(shù)及病害分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)上缺乏統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)，本文開展了相關(guān)研究，目的是建立一套十字花科根腫病室內(nèi)接種標(biāo)準(zhǔn)體系。
　　 1.休眠孢

2、子萌發(fā)鑒別
　　 對(duì)普通顯微鏡結(jié)構(gòu)進(jìn)行了改進(jìn)，移動(dòng)聚光器位置，使光線斜射入標(biāo)本而表現(xiàn)微分干涉觀察效果，并與3種染色方法對(duì)休眠孢子萌發(fā)鑒別效果作了比較。結(jié)果表明:改進(jìn)的普通顯微鏡能夠更好地區(qū)分休眠孢子是否萌發(fā)，這對(duì)后續(xù)萌發(fā)條件、接種標(biāo)準(zhǔn)化的研究奠定基礎(chǔ)。
　　 2.孢子懸浮液的制備
　　 腫根不同腐爛溫度、腐爛時(shí)間對(duì)榨菜發(fā)病的影響試驗(yàn)，結(jié)果顯示在溫度25℃、腐爛5天時(shí)，榨菜接種根腫菌后的發(fā)病率最高，表明該腐爛處理可

3、提升休眠孢子的侵染。
　　 接種所用休眠孢子液制備中，腫根用無(wú)菌水稀釋5倍，間歇性攪拌7min，獲得的勻漿液先用1層紗布過濾、再用4層紗布過濾，獲得的濾液中孢子的損失率最低，植物殘?jiān)?，孢子濃度能夠被?zhǔn)確測(cè)量且孢子最高。
　　 3.接種方法比較及優(yōu)化
　　 比較了兩種接種方法，病土芯不同濃度、不同重量、不同直徑，寄主不同生育期等接種條件對(duì)發(fā)病的影響。結(jié)果表明:菌土接種發(fā)病率(77.50％)低于灌根接種的發(fā)病率(8

4、7.50％)，但穩(wěn)定性高于灌根接種;病土芯最優(yōu)濃度為8×107個(gè)孢子/克，最優(yōu)重量為20g，最優(yōu)直徑為25mm。在第1天接種的發(fā)病率(73.33％)顯著低于育苗15天時(shí)接種的發(fā)病率(90.00％)。
　　 比較接種后40、50、60、70天的榨菜發(fā)病情況，結(jié)果表明，在第50天調(diào)查時(shí)，病情最穩(wěn)定，發(fā)病率較高?？勺鳛椴『φ{(diào)查的最佳時(shí)間。
　　 4.病害調(diào)查與室內(nèi)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的建立
　　 比較了地上部分鮮重、全株鮮重、地上

5、部鮮重與全株鮮重比與4種常用分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)性大小，結(jié)果表明:地上部鮮重與全株鮮重比與各分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)均呈顯著性相關(guān)，因此，該指標(biāo)能準(zhǔn)確反映苗期病害的嚴(yán)重度。
　　 對(duì)100株接種后的榨菜幼苗按單株地上部鮮重與全株鮮重比值大小進(jìn)行分組，依據(jù)每組榨菜幼苗的癥狀描述，結(jié)合李妍、郭向華的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，提出新的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn):0級(jí):無(wú)腫瘤。1級(jí):側(cè)根腫大。3級(jí):主根腫大，其直徑小于莖基部的2倍，側(cè)根腫大數(shù)量小于50％的根系。5級(jí):主根腫大，其直徑小于莖基

6、部的3倍，側(cè)根腫大數(shù)量占50％～75％的根系。7級(jí):主根腫大，其直徑是莖基部的3～4倍或側(cè)根腫數(shù)量大于75％根系。9級(jí):主根腫大，其直徑大于莖基部的4倍。
　　 比較4種參考的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)和自擬分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)在不同接種條件下的病情相關(guān)性差異，結(jié)果表明:自擬的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)在榨菜生長(zhǎng)15天時(shí)，采用菌土接種對(duì)地上部鮮重與全株鮮重比值的相關(guān)性影響最大(R=-0.641)，自擬標(biāo)準(zhǔn)與參考分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)均呈高度相關(guān)。表明自擬分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)在該接種條件下，最能準(zhǔn)確反映