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1、香蕉細(xì)菌性軟腐病是嚴(yán)重威脅香蕉生產(chǎn)的細(xì)菌性病害,已被列入《中華人民共和國(guó)進(jìn)境植物檢疫有害生物名錄》。2009年該病害在我國(guó)廣東首次被發(fā)現(xiàn),危害日趨嚴(yán)重,初步鑒定香蕉細(xì)菌性軟腐病菌為Dickeyasp.。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)香蕉細(xì)菌性軟腐病菌的報(bào)道多見(jiàn)于培養(yǎng)性狀、生理生化特性和防治方法等研究,而對(duì)菌株間的致病性分化和品種抗性的研究未見(jiàn)報(bào)道。
本研究采用離體針刺接種粉蕉假莖和盆栽針刺接種粉蕉植株兩種方法,對(duì)分離自廣東珠海和南沙地區(qū)的
2、14株香蕉細(xì)菌性軟腐病菌進(jìn)行致病性測(cè)定。結(jié)果表明,兩種方法均可將供試的14個(gè)菌株的致病力劃分為強(qiáng)(++++)、較強(qiáng)(+++)和中等(++)3個(gè)類型。在兩種方法中,致病力強(qiáng)的菌株劃分的結(jié)果都相同,致病力較強(qiáng)的菌株和致病力中等的菌株劃分的結(jié)果基本一致。此外,本研究還發(fā)現(xiàn),來(lái)源于同一地區(qū)的菌株之間有著相似的致病性,而來(lái)源于不同地區(qū)的菌株之間存在致病性的分化。
通過(guò)細(xì)菌16SrDNA和看家基因gapA、mdh的序列分析,以及16S
3、-23SrDNA轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)PCR(ITS-PCR)和細(xì)菌基因組的重復(fù)序列PCR(Rep-PCR)技術(shù),對(duì)香蕉細(xì)菌性軟腐病菌的遺傳分化進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,14株細(xì)菌與Dickeya的6個(gè)模式種的序列同源性均達(dá)到97%以上,絕大多數(shù)菌株的同源性可達(dá)99%以上,相似度較高。因此,利用細(xì)菌的16SrDNA,我們初步認(rèn)為香蕉細(xì)菌性軟腐病菌均屬于Dickeya。對(duì)兩個(gè)看家基因gapA和mdh的分析結(jié)果表明,絕大多數(shù)菌株間的同源性較高,菌株間存在明
4、顯的遺傳分化現(xiàn)象;利用ITS-PCR擴(kuò)增,可將供試菌株劃分為6個(gè)組群;而利用細(xì)菌基因組重復(fù)序列通用引物BOX和J3進(jìn)行Rep-PCR擴(kuò)增,在遺傳距離為0.52時(shí),供試菌株可被劃分為2個(gè)組群;在遺傳距離為0.65時(shí),供試菌株可被劃分為4個(gè)組群。因此,通過(guò)對(duì)14個(gè)菌株的遺傳分析表明,初步推斷引起廣東地區(qū)香蕉細(xì)菌性軟腐病的病原菌存在遺傳分化現(xiàn)象。
已有研究表明,在我國(guó)主栽的7個(gè)香蕉品種中,粉蕉為中感品種。鑒于粉蕉的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)
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