基于2-疊氮甲基芳基甲酸酯熒光探針的合成及應(yīng)用.pdf

1、硫化氫是繼一氧化碳和一氧化氮之后被證實的第三個內(nèi)源性氣體信號分子，在生物體病理和生理等方面發(fā)揮著重要作用。過氧化氫作為一種重要的氧化物，在維持生物體正常生命活動過程中扮演著重要角色。因此，在生物體中對它們的追蹤和監(jiān)測具有重要意義。相比傳統(tǒng)檢測方法，熒光光譜法具有高靈敏度、高選擇性并能實現(xiàn)原位檢測等優(yōu)點。因此，設(shè)計與合成檢測細胞中硫化氫和過氧化氫的新型熒光分子探針具有重要意義。
　　本文針對傳統(tǒng)硫化氫熒光探針選擇性差、靈敏度低及響應(yīng)

2、速度慢的問題，基于硫化氫可將2-(疊氮甲基)-4-(硝基)苯甲酸酯的疊氮還原并發(fā)生分子內(nèi)反應(yīng)釋放熒光團的原理，以Rhodol為熒光團合成了新型硫化氫探針ANR。ANR對硫化氫具有優(yōu)異的選擇性，響應(yīng)迅速，4分鐘內(nèi)即可達到滿意的熒光強度；ANR對硫化氫濃度具有很高的靈敏度，檢測限低至0.4327μM。MTT法表明探針ANR對細胞幾乎沒有毒性，探針在細胞中對硫化氫良好的成像作用證明ANR可以成為一種性能優(yōu)異的生物體內(nèi)H2S熒光探針。
　

3、　在測試工作中，我們發(fā)現(xiàn)由7-Cl-Rhodol與2-(疊氮甲基)苯甲酸合成的分子ACR對硫化氫沒有響應(yīng)，而對過氧化氫具有優(yōu)異的選擇性。進一步測試顯示，ACR對過氧化氫響應(yīng)迅速，靈敏度高，具有優(yōu)異的抗干擾性。探針ACR具有較低的細胞毒性，在細胞中對過氧化氫的良好成像表明，ACR可以很好的應(yīng)用于生物體內(nèi)過氧化氫的測試。
　　基于對ACR的研究，我們以2’,7’-二氯Rhodol和2-(疊氮甲基)苯甲酸合成了另一種過氧化氫熒光探針AC

4、F。ACF對過氧化氫響應(yīng)非常迅速，5分鐘時熒光強度已達到118倍；ACF對過氧化氫有著優(yōu)異的選擇性和抗干擾性，檢測限低至6.5 nM，靈敏度很高；ACF可以對濃度為50-400μm濃度的過氧化氫進行定性甚至定量的檢測。ACF對細胞幾乎沒有毒性，探針在細胞中對過氧化氫響應(yīng)迅速，成像良好，可以作為一種性能優(yōu)異的內(nèi)源性過氧化氫熒光探針投入應(yīng)用。
　　本論文以2-疊氮甲基芳基甲酸酯為新型反應(yīng)位點，設(shè)計合成了硫化氫熒光探針ANR、過氧化氫熒