GnRH、GTH、Gh及其受體在山羊垂體-卵巢軸中的發(fā)育性變化.pdf

1、促性腺激素(GTH)、促性腺激素釋放激素(GnRH)、生長(zhǎng)激素(GH)及Ghrelin在哺乳動(dòng)物的生殖調(diào)控中起著關(guān)鍵作用，其生理調(diào)控作用主要是通過與相應(yīng)的受體FSHR、LHR、GnRHR、GHR結(jié)合來介導(dǎo)完成。因此，研究這些激素和受體在生后發(fā)育過程中垂體、卵巢內(nèi)的表達(dá)與分布情況，是理解其在生殖發(fā)育調(diào)控中如何影響垂體-卵巢軸作用機(jī)理的基礎(chǔ)。
　　 本試驗(yàn)以D0-D180日齡的雌性濟(jì)寧青山羊?yàn)檠芯繉?duì)象，采用免疫組織化學(xué)、RT-PCR

2、和Western-blot方法研究從出生至性成熟(D0-D180)過程中垂體-卵巢軸中這些激素和受體表達(dá)定位以及mRNA表達(dá)規(guī)律，結(jié)果表明:
　　 D0-D180日齡血清中雌激素(E2)含量差異顯著，孕激素變化趨勢(shì)與E2相近，含量均以D0為多，D30顯著下降，在D90和D180分別出現(xiàn)兩個(gè)峰值，P是D120驟然上升。FSH在D0、D90有所升高;LH變化趨勢(shì)基本同E2，在D90出現(xiàn)峰值。P的峰值出現(xiàn)是在LH之后，符合LH在促進(jìn)排

3、卵后，刺激P分泌的生理規(guī)律。而E2、 FSH、LH含量在D90時(shí)處于高峰，可能是濟(jì)寧青山羊發(fā)情早的原因之一。
　　 垂體內(nèi)FSH、LH、Ghrelin、GnRH、GnRHR、GH、GHR、AR陽性細(xì)胞及其mRNA在D0-D180日齡山羊腺垂體內(nèi)均有分布和表達(dá)，陽性細(xì)胞呈區(qū)域狀分布，隨著日齡增長(zhǎng)陽性區(qū)域也增大。垂體細(xì)胞內(nèi)GH、Ghrelin與LH分布特點(diǎn)和mRNA變化趨勢(shì)相同，以D60顯著高于其他月齡(p＜0.05），其次是D30

4、、D90，提示在D30-90階段垂體細(xì)胞通過大量合成分泌這些激素，調(diào)控垂體自身及卵巢等器官的功能活動(dòng)，這可能是濟(jì)寧青山羊性成熟早的物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　 垂體和卵巢GnRHR、GHR、AR mRNA表達(dá)量在D60-D180間變化不大，提示受體含量在生后發(fā)育至性成熟階段是相對(duì)恒定的，真正影響功能發(fā)揮的是取決于其相應(yīng)激素含量和分布位置。在垂體和卵巢內(nèi)有Ghrelin、GnRH免疫陽性細(xì)胞和mRNA表達(dá)，可能是源于垂體和卵巢對(duì)Ghrelin

5、、GnRH的“需求”，并通過自身細(xì)胞以自分泌或旁分泌的方式來產(chǎn)生。AR陽性細(xì)胞的存在說明垂體和卵巢細(xì)胞也接受雄激素的調(diào)控，AR在垂體是D60階段高表達(dá)，與綿羊相同;而AR在卵巢隨著卵泡發(fā)育，在基質(zhì)細(xì)胞和顆粒細(xì)胞內(nèi)表達(dá)量增多。
　　 FSHR、LHR、Ghrelin、GHR陽性細(xì)胞在各月齡山羊的卵巢內(nèi)分布位置因日齡不同而呈現(xiàn)較大差異。特別是在剛出生的D0階段存在明顯差異。在剛出生時(shí)集中分布在不規(guī)則原始卵泡的卵母細(xì)胞內(nèi)，但隨月齡增長(zhǎng)

6、，是在少數(shù)次級(jí)卵泡上存在，D30-180階段常在1-2個(gè)生長(zhǎng)卵泡上分布。當(dāng)次級(jí)卵泡發(fā)生閉鎖，則可在卵泡壁上見有環(huán)形排列的Ghrelin、GHR陽性細(xì)胞均勻分布。卵巢內(nèi)動(dòng)脈管壁的平滑肌上呈GHR、FSHR、LHR、GnRHR、GnRH陽性，而Ghrelin在動(dòng)脈管壁周圍的結(jié)締組織呈強(qiáng)陽性。幾種物質(zhì)的mRNA表達(dá)量與組化結(jié)果變化趨勢(shì)基本相近，
　　 結(jié)論:垂體內(nèi)的FSH、LH、GH、Ghrelin、GnRH、GnRHR在生后發(fā)育過程