TRAIL及其受體在卵巢癌細胞凋亡中的作用.pdf

1、目的：TRAIL是一個重要的凋亡調節(jié)蛋白，它能夠選擇性誘導腫瘤細胞凋亡而對正常細胞不產生明顯毒副作用，因此TRAIL在腫瘤治療中具有良好的前景。為探討TRAIL以及化療藥物(DDP)與TRAIL聯合作用對卵巢癌細胞凋亡的影響，化療藥物對TRAIL受體表達的影響，本研究檢測TRAIL及其受體在正常卵巢和上皮性卵巢癌組織中的表達情況；行體外、體內實驗探討TRAIL對卵巢癌細胞株SKOV3細胞凋亡的影響，化療藥物(DDP)對TRAIL促凋亡作

2、用的影響及對TRAIL促凋亡受體DR4、DR5表達的影響。旨在研究TRAIL在卵巢癌細胞凋亡中的作用，以及研究TRAIL與DDP等化療藥物協同作用對卵巢癌細胞凋亡的影響。方法：采用(1)免疫組化LSAB法分別對21例正常卵巢和37例上皮性卵巢癌組織中TRAIL和受體DR4、DcR1的表達進行檢測。(2)MTT法檢測TRAIL及化療藥物對SKOV3細胞生長抑制的影響，用流式細胞儀檢測TRAIL促SKOV3細胞凋亡作用，用RT-PCR方法檢

3、測化療藥物對SKOV3細胞的TRAIL受體DR4、DR5的影響。(3)建立SKOV3細胞的裸鼠腹腔移植瘤模型，通過腹腔給藥方式，檢測TRAIL和/或DDP對移植瘤的抑制作用及對裸鼠肝腎功能的影響，用RT-PCR方法研究DDP對移植瘤細胞DR4、DR5表達的影響。所有數據均采用SPSS10.0軟件進行處理分析。 結果：(1)上皮性卵巢癌的DR4和DcR1表達均明顯比正常卵巢組織低。(2)高中分化卵巢癌DR4陽性率92.31％，而低

4、分化卵巢癌DR4的陽性率為62.50％，隨著卵巢癌的分化程度越低DR4表達水平也越低。TRAIL和受體DR4、DcR1的表達與臨床分期、組織學類型、淋巴結轉移等因素無關。(3)TRAIL及其受體DR4、DcR1兩兩之間無直線相關關系。(4)TRAIL蛋白對SKOV3細胞生長有抑制作用。(5)DDP與不同濃度的TRAIL共同作用于SKOV3細胞時，在TRAIL濃度達到10ng/ml及以上濃度時，抑制率明顯升高(P＜0.05)。阿霉素與不同

5、濃度的TRAIL共同作用時，在TRAIL濃度達到8ng/ml及以上濃度時，抑制率明顯升高(P＜0.05)。(6)流式細胞儀檢測SKOV3正常對照組、TRAIL組和TRAIL+DDP組細胞凋亡率分別為5.9％、13.4％、39.5％，各實驗組與對照組比較有顯著性差異(P＜0.05)。TRAIL蛋白使細胞更多地停留在G0-G1期，有絲分裂細胞減少。(7)DDP使SKOV3細胞DR5水平明顯升高，為對照的1.95倍，DR4水平升高為對照1.5

6、4倍(P＜0.05)，而阿霉素、卡鉑、5-FU處理后SKOV3細胞DR4、DR5表達無明顯改變(P＞0.05)。(8)各實驗組(TRAIL組、DDP組、TRAIL+DDP組)與對照組比較裸鼠腹腔內移植瘤濕重均明顯降低，以TRAIL+DDP組最明顯(P＜0.05)。(9)DDP組裸鼠的BUN、CREA均有明顯升高，TRAIL+DDP組肝功能ALT升高(P＜0.05)。(10)DDP使移植瘤的DR5表達明顯升高為對照組2.24倍，使DR4表

7、達升高為對照組1.82倍(P＜0.05)。而TRAIL處理后DR5、DR4表達水平沒有明顯變化。 結論：(1)上皮性卵巢癌的DR4和DcR1表達均明顯比正常卵巢組織低，DR4表達水平隨著卵巢癌的分化程度越低也越低，提示DR4表達可能與卵巢癌的預后有關，促凋亡受體DR4和拮抗凋亡受體DcR1的表達沒有相關性；(2)體外實驗顯示TRAIL蛋白單獨使用對SKOV3細胞生長有抑制作用，腫瘤細胞凋亡率升高，TRAIL與DDP聯合使SKOV