短蛸甲硫氨酸腦啡肽的組化定位及其免疫調(diào)節(jié)機(jī)制.pdf

1、頭足類軟體動物的免疫系統(tǒng)還很不成熟，主要依賴血細(xì)胞吞噬、水解酶、氧化酶、活性氧等介導(dǎo)的非特異性免疫抵御病原生物，但頭足類體內(nèi)具有腦啡肽(enkephalin,ENK)、白細(xì)胞介素-1(interleuldns-1，IL-1)、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)等活性肽和細(xì)胞因子，對其免疫防御起著重要的調(diào)節(jié)作用。甲硫氨酸腦啡肽(met-enkephalin，Met-ENK)是一種阿片神經(jīng)肽。隨著阿片肽及其受

2、體功能研究的深入，人們發(fā)現(xiàn)阿片肽對心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)等都有重要的調(diào)節(jié)作用。而有關(guān)短蛸(Octopus ocellatus)Met-ENK免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的研究還未見報道。本文采用免疫組織化學(xué)方法對Met-ENK、δ和μ受體在短蛸各組織器官中的分布進(jìn)行了研究，且采用生化測定的方法研究了不同濃度的Met-ENK對短蛸血淋巴中幾種體液免疫因子或自由基的影響，以期為頭足類軟體動物免疫學(xué)研究積累資料。 免疫組織化學(xué)定位結(jié)果表明：(

3、1)在短蛸的腦神經(jīng)節(jié)、足神經(jīng)節(jié)、臟神經(jīng)節(jié)、視神經(jīng)節(jié)、外套神經(jīng)節(jié)、口球、食道、嗉囊、胃、胃盲囊、腸、直腸、前唾液腺、后唾液腺、肝胰臟、鰓、鰓腺、心室、鰓心、腎靜脈腺質(zhì)附屬物、卵巢、輸卵管腺、外套膜背面、外套膜腹面、腕、腕間膜、漏斗中檢測到呈不同陽性反應(yīng)的Met-ENK分子。 (2)在短蛸的腦神經(jīng)節(jié)、足神經(jīng)節(jié)、臟神經(jīng)節(jié)、外套神經(jīng)節(jié)、口球、食道、嗉囊、胃、胃盲囊、腸、后唾液腺、鰓、鰓腺、心室、鰓心、腎靜脈腺質(zhì)附屬物、卵巢、輸卵管腺、外套膜背面

4、、外套膜腹面、腕、腕間膜、漏斗中檢測到呈不同陽性反應(yīng)的δ受體。(3)在短蛸的食道、胃、外套膜背面、腕間膜中檢測到呈不同陽性反應(yīng)的μ受體。Met-ENK和δ、μ受體在短蛸體內(nèi)不同部位的分布，表明Mot-ENK通過與δ、μ受體結(jié)合，可能參與了短蛸神經(jīng)、消化、呼吸、排泄、感覺、運動和免疫等功能的調(diào)節(jié)。神經(jīng)系統(tǒng)分泌的Met-ENK，可能沿神經(jīng)纖維或血液循環(huán)分布到其它組織。而Met-ENK和δ、μ受體在短蛸不同部位分布密度的不同，可能與各器官的功

5、能不同有關(guān)。 生化測定結(jié)果表明： (1)Met-ENK濃度為1.00μg/ml和5.00μg/ml時，對短蛸血清MetAP活力有較弱的抑制作用；Met-ENK濃度為25.00μg/ml時，對短蛸血清MetAP活力有較強(qiáng)的抑制作用。Met-ENK對短蛸血細(xì)胞MetAP活力有很強(qiáng)的促進(jìn)效應(yīng)，且此效應(yīng)具濃度依賴性。 (2)Met-ENK濃度為1.00μg/ml和25.00μg/ml時，短蛸血細(xì)胞CAT活力均高于對照組；3種濃度的Met

6、-ENK，實驗組血清CAT活力均低于對照組。Met-ENK濃度為5.00μg/ml和25.00μg/ml時，血細(xì)胞H2O2含量均高于對照組，Met-ENK濃度為1.00μg/ml時，實驗組血細(xì)胞H2O2含量低于對照組；3種濃度的Met-ENK，實驗組血清H2O2含量均低于對照組。(3)Met-ENK對不依賴鹵素的短蛸血清MPO活力有較弱的抑制效應(yīng)，且此效應(yīng)具濃度依賴性。低濃度的Met-ENK對短蛸血細(xì)胞MPO活力有很強(qiáng)的促進(jìn)作用，較高濃

7、度的Met-ENK對短蛸血細(xì)胞MPO活力有較弱的促進(jìn)作用。(4)Met-ENK可使短蛸血清和血細(xì)胞中GSH含量減少，可降低短蛸血淋巴的抗氧化能力。(5)Met-ENK對短蛸血清ANAE活力有很強(qiáng)的抑制作用。低濃度的Met-ENK對短蛸血細(xì)胞ANAE活力有較強(qiáng)的抑制作用，較高濃度的Met-ENK對短蛸血細(xì)胞ANAE活力有很強(qiáng)的抑制作用?？傊琈et-ENK對短蛸起著重要的免疫調(diào)節(jié)作用，其作用機(jī)制可能是通過與血細(xì)胞表面的受體結(jié)合而起作用的。