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文檔簡介
1、當內(nèi)臟發(fā)生疾病時,體表相應部位出現(xiàn)皮下結節(jié)、牽涉痛、皮疹等病理反應的臨床報道很多,這些病理反應常常伴隨著疾病的發(fā)生而出現(xiàn),并隨著疾病的自愈而消退。這種內(nèi)臟疾病能反應到體表的現(xiàn)象,中醫(yī)遠在兩千年前早已發(fā)現(xiàn),《素問·藏氣法時論》記載:“心痛者,胸中痛,脅支滿、膺背肩甲間痛,兩臂內(nèi)痛?!睆拇嗣枋稣f明中國古代醫(yī)生早已發(fā)現(xiàn)心痛可以反應到肩甲、兩臂內(nèi)側等處,這不僅與臨床上冠心病牽涉痛常出現(xiàn)的部位相一致,也正是十二經(jīng)脈中心經(jīng)經(jīng)脈循行所過之處.因此,也
2、有學者認為中醫(yī)的經(jīng)脈一臟腑相關理論是世界上最早的軀體一內(nèi)臟相關學說。
基于中醫(yī)經(jīng)脈一臟腑相關理論和西醫(yī)的軀體一內(nèi)臟相關學說,近年有學者提出腧穴面積的大小和功能的強弱會隨著內(nèi)臟功能的變化而發(fā)生改變的動態(tài)概念,并將這一規(guī)律稱為腧穴的敏化。敏化腧穴不僅是一種新型的內(nèi)臟疾病在體表的病理反應點,還是針灸治療內(nèi)臟疾病的最佳刺激點,當內(nèi)臟發(fā)生疾病時,體表沉寂的腧穴可以被激活,其功能變得敏感而活躍,對相應內(nèi)臟調(diào)節(jié)功能的“質(zhì)”或“量”也會發(fā)
3、生相應的變化。
針灸可以治療內(nèi)臟疾病,緩解內(nèi)臟疼痛,其療效與電針強度、取穴部位密切相關。有關針刺鎮(zhèn)痛的研究發(fā)現(xiàn)在同神經(jīng)節(jié)段腧穴,針刺只要激活穴位深部的A類纖維就有明顯的鎮(zhèn)痛效應,而在異神經(jīng)節(jié)段腧穴,針刺須激活穴位深部的C類纖維才能發(fā)揮鎮(zhèn)痛效應。其機制可能與激活了脊髓和脊髓上中樞不同的內(nèi)源性鎮(zhèn)痛系統(tǒng)有關。
雖然針刺鎮(zhèn)痛的臨床和實驗研究很多,但是同時將痛源部位、體表敏化腧穴、電針強度綜合起來考慮的研究甚少,關于體
4、表敏化腧穴不同強度電針刺激緩解內(nèi)臟痛的量效關系研究還是空白。
本研究將具有軀體一內(nèi)臟感覺會聚功能的脊髓背角廣動力型(Wide Dynamic Rango,WDR)神經(jīng)元和延髓背側網(wǎng)狀核(SubnucleusReticularis Dorsalis,SRD)全身異覺異位會聚神經(jīng)元活動作為研究對象,觀察生理和病理狀態(tài)下這兩類會聚神經(jīng)元對不同強度電針傳入的量-效激活反應,以及不同強度電針傳入與內(nèi)臟傷害性傳入在這兩類神經(jīng)元的相互作
5、用,來探討腧穴敏化的規(guī)律和機制、電針鎮(zhèn)痛的量效關系,以期闡明電針治療內(nèi)臟痛的最佳刺激部位和刺激強度,為臨床提高電針鎮(zhèn)痛效應提供參考。
1、材料和方法:實驗選用健康成年SD大鼠,體重250-300g,用10%的烏拉坦(urethane,1.0-1.2g/kg)腹腔注射麻醉,玻璃微電極細胞外記錄神經(jīng)元放電。
所有記錄到的神經(jīng)元都用刷毛法觀察其外周感受野在體表的分布范圍,分別檢驗其體表感受野對各種機械刺激(包括觸摸
6、、電針、齒鑷夾皮)的反應和直結腸擴張刺激引起的反應,鑒定神經(jīng)元的性質(zhì)。在脊髓背角,凡是能夠對來自體表感受野的各種機械刺激和來自內(nèi)臟的擴張刺激均起激活反應的神經(jīng)元,就被確定為WDR神經(jīng)元;在延髓,凡是具有全身性的感受野,并且只能特異性地被體表和內(nèi)臟的傷害性刺激激活,而對非傷害性刺激不發(fā)生反應的神經(jīng)元就被確定為SRD神經(jīng)元。
內(nèi)臟傷害性刺激采用直結腸擴張法,將一長約5-6cm的氣囊經(jīng)肛門插入直結腸,插入的深度約為4cm。內(nèi)臟傷
7、害性刺激由插入直結腸內(nèi)的氣囊充氣超過20-50s實現(xiàn)。實驗過程中直結腸擴張壓力控制在60-80mmHg之間(≥40mmHg為傷害性刺激),兩次重復的CRD刺激應至少間隔4min。
分別在大鼠L2-4節(jié)段脊髓背角和延髓背側網(wǎng)狀亞核進行單細胞記錄。觀察內(nèi)容分兩部分:(1)觀察WDR和SRD神經(jīng)元在傷害性CRD刺激穩(wěn)定激活的基礎上,同時給予不同強度電針刺激對CRD引起的神經(jīng)元痛敏反應的影響,探討電針鎮(zhèn)痛的量效關系;(2)觀察在持
8、續(xù)lmin的傷害性CRD刺激前后,這兩類神經(jīng)元對來自感受野單純電針刺激的量一效激活反應的變化,探討腧穴敏化的規(guī)律及其機制。
2、結果
2.1、脊髓水平的實驗結果
于93只SD大鼠脊髓背角的L2-4節(jié)段共記錄到168個神經(jīng)元。其中廣動力型(wide dynamic range neuron,WDR)神經(jīng)元118個。大部分WDR神經(jīng)元位于脊髓板層的第Ⅳ和Ⅴ層,其外周感受野主要分布于記錄部位同側下半部
9、皮膚,如:尾巴、下肢、會陰和臀部。
在12個WDR神經(jīng)元觀察到60mmHg CRD刺激引起的神經(jīng)元放電活動的激活率為100.90±21.41%,和背景活動相比有非常顯著的差異(P<0.001),表明WDR神經(jīng)元對來自同節(jié)段的內(nèi)臟傷害性傳入有穩(wěn)定的激活反應。
在60mmHg CRD刺激引起WDR神經(jīng)元穩(wěn)定激活的基礎上,我們在體表非感受野分別觀察了同神經(jīng)節(jié)段穴區(qū)(選擇位于記錄部位對側“足三里”穴區(qū)為中心)和異神經(jīng)
10、節(jié)段穴區(qū)(選擇位于記錄部位對側“內(nèi)關”穴區(qū)為中心)不同強度(1mA、2mh、4mA、6mA、8mA)電針刺激對CRD引起的神經(jīng)元激活反應的影響。
在同神經(jīng)節(jié)段,電針能有效抑制CRD引起的WDR神經(jīng)元的激活反應,和單純CRD刺激引起的WDR神經(jīng)元的激活反應相比,其抑制率分別為:11.43±3.40S(1mA)(P0.05)、25.56±2.69%(2mA)(P<0.001)、46.35±3.44%(4mA)(P<0.001)
11、、49.96±3.08%(6mA)(P<0.001)、47.04±4.79%(8mA)(P<0.001).
而在異神經(jīng)節(jié)段,1mA電針刺激對CRD引起的WDR神經(jīng)元的激活反應沒有產(chǎn)生明顯影響,與單純CRD刺激時神經(jīng)元的反應相比沒有統(tǒng)計學差異(P>0.05);當電針強度達到2mA時,我們開始觀察到電針對CRD引起的WDR神經(jīng)元的激活反應的抑制效應。從2-8mA,其抑制率分別為:19.70±6.61%(2mA)(P<0.05)
12、、33.71±3.93%(4mA)(P<0.001)、40.25±4.71%(6mA)(P<0.001)、40.44±5.68%(8mA)(P<0.001)。
表明當電針強度為1mA時,只能引起節(jié)段性的抑制效應;而當電針強度達到2mA時,能引起廣泛性的抑制效應;當電針強度達到4-6mA時,這種抑制效應還會到達一個平臺期。
之后,我們觀察了體表感受野穴區(qū)(選擇位于記錄部位同側的“足三里”穴區(qū)為中心)不同強度電針
13、傳入與內(nèi)臟傷害性傳入在WDR神經(jīng)元的相互作用。
首先觀察單純電針刺激對WDR神經(jīng)元的量-效激活反應,和神經(jīng)元背景活動相比,單純電針刺激引起的WDR神經(jīng)元的激活率分別為:14.50±4.63%(1mA)(P<0.05)、40.09±6.27%(2mA)(P<0.001)、99.47±13.18%(4mA)(P<0.001)、156.62±20.50%(6mA)(P<0.001)、189.15±11.33%(8mA)(P<0.
14、001)??梢?從1mA-8mA的范圍內(nèi),WDR神經(jīng)元對單純電針刺激的激活反應呈明顯的量-效線性遞增關系。
然后在CRD弓l起WDR神經(jīng)元穩(wěn)定激活的基礎上,同時給予電針刺激,當電針刺激強度為1mA時,電針對CRD引起的WDR神經(jīng)元激活反應無明顯影響(P>0.05)。當電針強度為2mA時,電針可以使WDR神經(jīng)元的激活反應進一步增強,神經(jīng)元的反應從單純CRD激活的基礎上依次再激活43.46±5.97%(2mA)(P<0.001
15、)、77.44±8.32%(4mA)(P<0.001)、85.29±7.08%(6mA)(P<0.001)、90.38±13.01%(8mA)(P<0.01)??梢?同時給予CRD和感受野電針兩種刺激,WDR神經(jīng)元在電針強度達到6mA時,其激活反應也接近平臺期。
這些結果還表明來自感受野穴位的電針傳入和來自內(nèi)臟的傷害性傳入可以在脊髓背角WDR神經(jīng)元產(chǎn)生易化的相互作用。
基于以上實驗結果,為了探討腧穴敏化的脊髓
16、機制,我們給予大鼠70-80mmHg CRD刺激持續(xù)1min造成內(nèi)臟傷害性損傷后,觀察WDR神經(jīng)元對感受野穴位單純電針刺激的激活反應的變化。實驗觀察到在CRD刺激后WDR神經(jīng)元對電針的激活反應明顯增強。CRD刺激前,電針引起的WDR神經(jīng)元放電活動的激活率分別為:18.19±7.49%(1mA)、105.39±17.21%(4mA)、175.81±20.16%(7mA)、200.14±23.49%(10mA);而CRD刺激后,電針弓I起的
17、WDR神經(jīng)元放電活動的激活率分別為:95.09±26.37%(1mA)、202.44±18.90%(4mA)、278.41±32.64%(7mA)、280.84±39.87%(10mA)。并且在CRD刺激后,當電針強度達到7mA時,WDR神經(jīng)元對電針的反應也接近平臺期。表明持續(xù)的傷害性內(nèi)臟傳入可以易化脊髓背角WDR神經(jīng)元,使其對來自體表感受野穴位的電針傳入產(chǎn)生更強烈的反應。
2.2、延髓水平的實驗結果
于49
18、只SD大鼠的延髓背角共記錄到68個延髓背側網(wǎng)狀亞核(Subnucleus Reticularis Dotsalis,SRD)神經(jīng)元。
在16個SRD神經(jīng)元系統(tǒng)觀察了分級的CRD刺激引起的反應,在20-80mmHg的范圍內(nèi),隨著內(nèi)臟擴張壓力的升高,神經(jīng)元反應的強度也隨之增加,呈現(xiàn)出明顯的量一效線性關系。表明SRD神經(jīng)元對傷害性強度的內(nèi)臟擴張刺激能做出準確的應答反應。
由于這類神經(jīng)元具有全身性的感受野,在60mm
19、Hg CRD刺激引起SRD神經(jīng)元穩(wěn)定激活的基礎上,我們觀察了與直結腸同神經(jīng)節(jié)段的“足三里”穴區(qū)(取對側)不同強度(1mA、2mA、4mA、6mA、8mA)電針刺激對CRD引起的SRD神經(jīng)元激活反應的影響.
實驗觀察到1mA電針刺激對CRD引起的SRD神經(jīng)元的激活反應沒有明顯影響,電針后神經(jīng)元的反應和單純CRD刺激效應相比沒有統(tǒng)計學差異(P>0.05);2mA電針刺激對CRD引起的SRD神經(jīng)元的激活反應有一定的抑制作用,其抑
20、制率為19.43±3.28%(P<0.01)、4mA、6mA、8mA電針刺激引起的抑制率分別為31.87±3.92%(P<0.001)、51.78±5.13%(P<0.001)、55.70±7.82%(P<0.01)。可見,隨著電針強度的增加,電針的抑制效應逐漸增強,但是當電針強度達到6mA時,這種抑制效應也接近平臺期。
為了探討腧穴敏化的延髓機制,這部分實驗同樣給予大鼠70-80mmHg CRD刺激持續(xù)1min造成內(nèi)臟傷
21、害性損傷后,觀察電針“足三里”穴區(qū)對SRD神經(jīng)元激活閾值和強度的變化,實驗選擇1.5mA和6mA分別代表低于和高于C類纖維閾值的的電針強度.
結果顯示在CRD刺激前,1.5mA電針刺激對SRD神經(jīng)元的放電活動沒有任何影響,與背景活動相比沒有統(tǒng)計學差異(P>0.05);而在CRD刺激后,1.5mA電針刺激能明顯激活SRD神經(jīng)元,神經(jīng)元的活動從背景活動的3.05±0.20spikes/s增加到4.81±0.46 spikes/
22、s,與背景活動相比,有非常顯著的差異(P<0.001)。
當電針強度達到6mA時,CRD刺激前后電針對SRD神經(jīng)元均有明顯的激活作用。CRD刺激前后,電針引起的SRD神經(jīng)元的激活率分別為318.34±53.56%、381.04±59.68%,CRD刺激前后的電針效應進行比較有顯著的差異(P<0.01)。表明給予大鼠傷害性內(nèi)臟擴張損傷后也可以易化延髓SRD神經(jīng)元。
3、結論:
本研究系統(tǒng)分析了體表
23、不同強度電針傳入和內(nèi)臟傷害性傳入在脊髓背角WDR神經(jīng)元和延髓背角SRD神經(jīng)元的相互作用,得出以下結論:電針可以在脊髓和延髓抑制內(nèi)臟傷害性反應,但是只有當電針達到一定的刺激強度時,電針的抑制效應才最明顯,但并不是電針刺激強度越大,電針的抑制效應越明顯。根據(jù)我們的實驗結果,在脊髓水平,同節(jié)段穴區(qū)電針刺激強度在4-6mA時、異節(jié)段穴區(qū)電針刺激強度在6mA時,就能取得良好的抑制效應;而在延髓水平,電針強度在6mA時也能取得良好的抑制效應。從抑制
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