分子印跡固相萃取技術(shù)在海洋有機(jī)污染物和麻痹性貝毒分離檢測(cè)中的應(yīng)用.pdf

1、分子印跡技術(shù)（Molecular Imprinting Technique, MIT）是一種制備高分子聚合物的新興技術(shù)，合成的高聚物被稱(chēng)為分子印跡聚合物（Molecularly Imprinted Polymer, MIP），具有選擇性高、穩(wěn)定性好、耐酸堿、可重復(fù)使用等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)在環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品安全、分離和色譜分析等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，其中，基于傳統(tǒng)固相萃取而發(fā)展起來(lái)的分子印跡固相萃取技術(shù)（Molecularly Imprinted So

2、lid-phase Extraction，MISPE），是近年來(lái)分子印跡研究的熱點(diǎn)之一。本文選取海洋環(huán)境中典型的有機(jī)污染物作為研究對(duì)象，制備相應(yīng)的分子印跡材料，通過(guò)離線(xiàn)模式的固相萃取，聯(lián)用高效液相色譜/質(zhì)譜等手段，建立相應(yīng)污染物及其微藻毒素的分析方法，為海洋環(huán)境中有機(jī)污染物和麻痹性貝毒的分離檢測(cè)提供一種新的思路和途徑。
　　論文的主要研究?jī)?nèi)容如下：
　　1）選取水產(chǎn)品養(yǎng)殖中已禁用的典型漁藥-三苯甲烷類(lèi)物質(zhì)作為印跡目標(biāo)，分別制

3、備孔雀石綠和結(jié)晶紫分子印跡聚合物，優(yōu)化聚合條件，利用掃描電鏡、紅外光譜和紫外光譜分析等手段，對(duì)聚合物的表面形貌、模板分子與功能單體之間的相互作用力及其分子識(shí)別機(jī)理等進(jìn)行研究，同時(shí)對(duì)模板分子在聚合物上的吸附容量和選擇識(shí)別性能進(jìn)行考察，最后以該印跡聚合物作為固相萃取填料，自制印跡固相萃取小柱，離線(xiàn)模式下對(duì)天然海水和魚(yú)蝦樣品中的孔雀石綠和結(jié)晶紫進(jìn)行分離富集和檢測(cè)。結(jié)果表明，自制分子印跡固相萃取小柱能去除樣品中復(fù)雜基質(zhì)的干擾，快速有效地對(duì)印跡目

4、標(biāo)實(shí)現(xiàn)分離富集，海水樣品和魚(yú)蝦樣品中均有三苯甲烷類(lèi)物質(zhì)檢出，但濃度低于國(guó)家現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)。
　　2）近年來(lái)，隨著近岸海水養(yǎng)殖的迅速發(fā)展，青島膠州灣內(nèi)的水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模和養(yǎng)殖密度日益增大，養(yǎng)殖水體已有惡化的趨勢(shì)?；前粪奏な撬a(chǎn)養(yǎng)殖中已禁用的磺胺類(lèi)抗生素的一種，但因其價(jià)格低廉，存在偷偷使用的現(xiàn)象。本文以傳統(tǒng)的本體聚合法制備磺胺嘧啶印跡聚合物，并制成固相萃取小柱，將其用于膠州灣海水中磺胺嘧啶的測(cè)定，加標(biāo)樣品的回收率為79.17％-86.54%，相

5、對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD是2.43%-4.32%（n=3），大面調(diào)查的七個(gè)海水樣品中，從灣西部?jī)蓚€(gè)站位中檢出磺胺嘧啶，海灣的東部和中部均沒(méi)有磺胺嘧啶檢出。
　　3）隨著毒素監(jiān)測(cè)在國(guó)內(nèi)的廣泛開(kāi)展，麻痹性毒素的分離純化，引起了人們的日益重視。膝溝藻毒素GTX2,3是我國(guó)海域產(chǎn)毒赤潮藻種中較為常見(jiàn)的一種麻痹性貝毒，毒性較強(qiáng)，分離提取難度較大，價(jià)格昂貴，本文采用片段印跡，選取膝溝藻毒素的結(jié)構(gòu)片段咖啡因作為虛擬模板，懸浮聚合法在水相中制備了分子印跡

6、微球，通過(guò)掃描電鏡和比表面積測(cè)定儀對(duì)印跡微球的形貌進(jìn)行表征，利用平衡吸附實(shí)驗(yàn)對(duì)膝溝藻毒素GTX2,3在印跡微球上的分子識(shí)別能力進(jìn)行考察，為下一步從產(chǎn)毒的微藻毒株中提取膝溝藻毒素提供了研究基礎(chǔ)。
　　以上一步實(shí)驗(yàn)中合成的咖啡因分子印跡微球?yàn)樘盍现苽涔滔噍腿⌒≈?，在離線(xiàn)模式下聯(lián)用HPLC，優(yōu)化淋洗和洗脫條件，建立了膝溝藻毒素GTX2,3的分離提取、檢測(cè)的方法，最后，從產(chǎn)毒微小亞歷山大藻株和塔瑪亞歷山大藻株的藻細(xì)胞粗提液中分離提取膝溝藻