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1、目的:以食物過敏小鼠為動(dòng)物模型,通過灌喂雙歧桿菌完整肽聚糖(Whole Peptidoglycan,WPG),觀察其對(duì)食物過敏的治療效果以及對(duì)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的作用;探討雙歧桿菌防治變態(tài)反應(yīng)性疾病的可能機(jī)制,為益生菌及其生物活性成分的進(jìn)一步開發(fā)利用提供依據(jù)。
方法:對(duì)象:無雞蛋喂養(yǎng)4~6周齡sPF級(jí)Balb/c雌鼠24只,隨機(jī)分為3組,每組8只。取其中2組建立食物過敏模型,分別為:OVA致敏陽性對(duì)照組(OVA組)和OVA激發(fā)后
2、灌喂雙歧桿菌WPG治療組(T組);同時(shí)設(shè)正常生理鹽水陰性對(duì)照組(C組)。方法:(1)觀察各組癥狀表現(xiàn);(2)HE染色觀察各組小腸組織形態(tài)學(xué)變化;(3)ELISA法檢測(cè)血清中OVA特異性IgE水平;(4)流式細(xì)胞術(shù)分析脾臟單個(gè)核細(xì)胞懸液中CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的數(shù)量變化;(5)ELISA法檢測(cè)血清中IL-10和TGF-β水平。
結(jié)果:(1)雙歧桿菌WPG對(duì)OVA介導(dǎo)的速發(fā)型變態(tài)反應(yīng)有緩解作用,T組僅12.5%(1/8
3、)的小鼠出現(xiàn)腹瀉且腹瀉程度較OVA組明顯減輕,而OVA組小鼠87.5%(7/8)出現(xiàn)腹瀉;T組小鼠平均體重增長(zhǎng)高于OVA組(P<0.05),HE染色可見小腸絨毛中上皮細(xì)胞局灶性壞死、脫落、固有層炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)現(xiàn)象明顯改善,OVA特異性IgE水平明顯降低,差異有顯著性(P<0.05);(2)OVA組與C組相比,小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)胞懸液中Foxp3陽性細(xì)胞(Foxp3+CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞)占CD4+CD25+T細(xì)胞含量顯著降低(P<
4、0.01),血清IL-10和TGF-β水平皆降低,差異皆有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);(3)T組小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)胞懸液中CD4+CD25+T細(xì)胞占CD4+T細(xì)胞含量高于OVA組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),較C組正常小鼠差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);T組小鼠脾細(xì)胞中Foxp3陽性細(xì)胞(Foxp3+CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞)占CD4+CD25+T細(xì)胞含量與OVA組相比顯著增高(P<0.01)。T組小鼠血清IL-10水平高于
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