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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:通過建立大鼠脾虛型胃潰瘍模型,研究八珍豬肚藥膳對(duì)胃潰瘍愈合作用的影響,并探討其可能的作用機(jī)制,為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:以68只SD大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,隨機(jī)分為正常組(18只)和脾虛組(50),采用大黃結(jié)合飲食失節(jié)法復(fù)制大鼠脾虛模型,大黃給藥9天后,兩組各取10只對(duì)脾虛模型進(jìn)行檢測(cè)。主要通過觀察大鼠一般狀況:進(jìn)食量、毛發(fā)、大便、活動(dòng)情況等;體重變化;游泳時(shí)間;檢測(cè)免疫功能方面的指標(biāo):胸腺及脾臟指數(shù)、白細(xì)胞介素-2
2、(IL-2)、免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)。脾虛組剩余的40只大鼠隨機(jī)分為模型組、八珍豬肚藥膳低劑量組、八珍豬肚藥膳中劑量、八珍豬肚藥膳高劑量組、雷貝拉唑組,采用改良的乙酸涂抹法制備脾虛胃潰瘍模型。造模3天后給藥,飼喂28天后,取材收集胃液、血清及胃組織,通過對(duì)脾虛指標(biāo)的改善情況、潰瘍面積、組織肉眼觀察及HE染色的病理形態(tài)對(duì)愈合情況進(jìn)行評(píng)價(jià)。并通過檢測(cè)胃液總酸度及胃蛋白酶活性,檢測(cè)血清丙二醛(MAD)、超氧化物歧化酶(SOD)和
3、一氧化氮(NO)、谷光氨肽過氧化物酶(GSH-Px)、胃泌素(GAS)、胃動(dòng)素(MTL),檢測(cè)組織中前列腺素E2(PGE2)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子mRNA(VEGFmRNA)的表達(dá)情況探討其可能的作用機(jī)理,各組數(shù)據(jù)均用x±s表示,用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,單因素方差分析,均采用組間兩兩比較。
結(jié)果:
1.動(dòng)物模型:采用大黃結(jié)合飲食失節(jié)法及改良的乙酸涂抹法制備脾虛胃潰瘍模型。大黃給藥后大鼠
4、出現(xiàn)體重減輕、活動(dòng)減少、便溏、被毛枯槁、拱背等現(xiàn)象,游泳時(shí)間縮短,胸腺、脾臟指數(shù)降低,IL-2、IgA、IgM、IgG等指標(biāo)降低,給藥后藥膳組上述現(xiàn)象有所改善,各指標(biāo)都有所回升,驗(yàn)證脾虛造模成功。大鼠胃壁涂抹乙酸后,胃壁顏色蒼白,周圍水腫充血。此潰瘍模型肉眼及鏡下觀察,其表現(xiàn)與人類潰瘍極為相似,且造模成功率高,方法簡(jiǎn)單,可操作性強(qiáng),是目前普遍認(rèn)可用于觀察藥物療效的模型。
2.肉眼及病理觀察
肉眼:模型組大鼠胃
5、粘膜缺損,深達(dá)肌層。各用藥組較模型組均有不同程度的愈合,藥膳各組的潰瘍面積均小于模型組,其中以高劑量組效果最好。
病理觀察:模型組大鼠粘膜破壞較嚴(yán)重,腺體排列紊亂,可見大量炎癥細(xì)胞及炎性滲出物;給藥組腺體排列較整齊,見少量炎癥細(xì)胞,其中鏡下觀察以高劑量組最佳。
3.對(duì)潰瘍面積的影響
與模型組相比,藥膳低、中、高劑量組及雷貝拉唑組潰瘍面積明顯減小(P<0.05或P<0.01)。藥膳高劑量組療效優(yōu)于
6、雷貝拉唑組(P<0.05)。
4.對(duì)胃液量、胃液酸度、胃蛋白酶活性的影響
與正常組相比,模型組胃液量明顯升高(P<0.01)。與模型組相比,藥膳低劑量組的胃液量無明顯變化(P>0.05),藥膳中、高劑量組及雷貝拉唑組胃液量降低(P<0.05或P<0.01)。雷貝拉唑組、藥膳高劑量組的胃液量無差異(P>0.05)。
與正常組相比,模型組胃液總酸度明顯降低(P<0.01)。與模型組相比,藥膳低劑量組
7、的胃液總酸度無明顯變化(P>0.05),藥膳中、高劑量組及雷貝拉唑組胃液總酸度降低(P<0.05或P<0.01)。雷貝拉唑組、藥膳高劑量組的胃蛋白酶活性無差異(P>0.05)。
與正常組相比,模型組胃蛋白酶活性明顯升高(P<0.01)。與模型組相比,藥膳低劑量組的胃蛋白酶活性無明顯變化(P>0.05),藥膳中、高劑量組及雷貝拉唑組的胃蛋白酶活性明顯降低(P<0.05或P<0.01)。雷貝拉唑組、藥膳高劑量組的胃蛋白酶活性無
8、差異(P>0.05)。
5.對(duì)丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽還原酶(GSH-Px)的影響
與正常組相比,模型組血清SOD活性明顯降低(P<0.01)。與模型組相比,藥膳低、中、高劑量組以及雷貝拉唑組的血清SOD活性均明顯升高(P<0.05或P<0.01)。與雷貝拉唑組相比,藥膳高劑量組的血清SOD活性升高(P<0.01)。
與正常組相比,模型組血清MDA含量明顯升高(P<0
9、.01)。與模型組相比,藥膳低、中、高劑量組及雷貝拉唑組的血清MDA含量均降低(P<0.05或P<0.01)。雷貝拉唑組與藥膳高劑量組的血清MDA無差異(P>0.05)。
與正常組相比,模型組血清GSH-Px活性明顯降低(P<0.01)。與模型組相比,藥膳低、中、高劑量組以及雷貝拉唑組的血清GSH-Px活性均明顯升高(P<0.05或P<0.01)。藥膳高劑量組血清GSH-Px活性高于雷貝拉唑組(P<0.05)。
10、 6.對(duì)一氧化氮(NO)的影響
與正常對(duì)照組相比,模型組血清NO含量明顯降低(P<0.01)。與模型組相比,藥膳中、高劑量組及雷貝拉唑組的血清NO含量均明顯升高(P<0.05或P<0.01)。藥膳高劑量組療效優(yōu)于雷貝拉唑組(P<0.05)。
7.對(duì)胃泌素(GAS)、胃動(dòng)素(MTL)的影響
與正常組相比,模型組血清GAS含量明顯升高(P<0.01)。與模型組相比,藥膳中、高劑量組及雷貝拉唑組的血
11、清GAS降低(P<0.05或P<0.01)。藥膳高劑量組優(yōu)于雷貝拉唑組(P<0.05)。
與正常組相比,模型組血清MTL含量明顯升高(P<0.01)。與模型組相比,藥膳各劑量組及雷貝拉唑組的血清MTL含量無差別(P<0.05)。但數(shù)據(jù)顯示藥膳組及雷貝拉唑組有降低胃動(dòng)素水平的趨勢(shì)。
8.對(duì)前列腺素E2(PGE2)、表皮生長(zhǎng)因子(EGF)的影響
與正常組相比,模型組PGE2含量明顯降低(P<0.05
12、)。與模型組相比,藥膳低、中、高劑量組及雷貝拉唑組的PGE2含量有差異(P<0.05或P<0.01)。藥膳高劑量組胃組織PGE2含量高于雷貝拉唑組(P<0.05)。
與正常組相比,模型組EGF含量明顯降低(P<0.05)。與模型組相比,藥膳中、高劑量組及雷貝拉唑組的EGF含量有差異(P<0.05或P<0.01)。藥膳高劑量組胃組織EGF含量高于雷貝拉唑組(P<0.01)。
9.對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子mRNA(VE
13、GFmRNA)表達(dá)的影響
與正常組相比模型組VEGFmRNA的相對(duì)表達(dá)量降低(2-△△CT<0.5);與模型組相比,藥膳低劑量組的VEGFmRNA的相對(duì)表達(dá)量無差異(0.5<2-△△CT<2)藥膳中高劑量組以及雷貝拉唑組VEGFmRNA的相對(duì)表達(dá)量增高(2-△△CT>2)。
結(jié)論:八珍豬肚藥膳對(duì)胃潰瘍具有較好促愈合作用,呈劑量依賴性。其機(jī)制可能與減輕胃粘膜的損傷(降低胃液量、胃液酸度、胃蛋白酶活性、GAS、M
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