八珍湯對小鼠造血功能影響的機制研究.pdf

1、該論文依照中醫(yī)"氣為血之帥"、"血為氣之母"的理論思維,運用現(xiàn)代生物檢測技術(shù),從宏觀整體到細胞、亞細胞、分子水平研究八珍湯對小鼠造血功能的影響.八珍湯源自《正體類要》,作為中醫(yī)古方氣血雙補的經(jīng)典方,由當(dāng)歸、川芎、白芍藥、甘草、熟地黃、人參、白術(shù)、茯苓組成.其藥理作用近年已多有報導(dǎo).臨床實驗表明:八珍湯不僅能治療白細胞減少癥,而且能改善嚴(yán)重的骨髓抑制.然而至今都未見有對其拮抗骨髓抑制在細胞水平和分子水平上的機理研究報道,為進一步深入探討八

2、珍湯影響造血的作用機理,以期為中醫(yī)氣血理論的科學(xué)內(nèi)涵提供現(xiàn)代科學(xué)的實驗依據(jù),從而為臨床用藥提供更加詳細和深入的理論依據(jù),進一步推動中醫(yī)氣血理論的發(fā)展.我們應(yīng)用現(xiàn)代分子生物學(xué)的理論較全面系統(tǒng)的闡明了八珍湯的補血作用.該實驗利用注射環(huán)磷酰胺(CY)等方法使小鼠造血功能受到抑制,造成血虛模型,觀察八珍湯對正常小鼠和血虛模型小鼠造血功能的影響.1.研究八珍湯對血虛模型小鼠和正常小鼠外周血象的影響調(diào)節(jié)作用.2.研究八珍湯對血虛模型小鼠和正常小鼠骨

3、髓細胞增殖的影響調(diào)節(jié)作用.3.采用脾結(jié)節(jié)計數(shù)法,研究八珍湯對血虛模型小鼠造血干細胞生成的影響.4.研究八珍湯對血虛模型小鼠和正常小鼠的CFU-GM集落數(shù)的影響調(diào)節(jié)作用.5.研究經(jīng)八珍湯體內(nèi)誘導(dǎo)制備的脾細胞條件培養(yǎng)液(SCM)、肺條件培養(yǎng)液(LCM)、腹腔巨噬細胞培養(yǎng)液(PMφCM)、肌條件培養(yǎng)液(SMCM)對血虛模型小鼠和正常小鼠的骨髓有核細胞增殖的影響調(diào)節(jié)作用.6.研究八珍湯對小鼠細胞分泌IL-1、IL-2、IL-3的影響.7.研究八

4、珍湯對脾條件培養(yǎng)液和腹腔巨噬細胞培養(yǎng)液中紅細胞生成素生成的影響.8.探討八珍湯對血虛模型小鼠的骨髓基質(zhì)細胞分泌TNF的影響調(diào)節(jié)作用.9.探討八珍湯對60Coγ射線照射小鼠骨髓細胞及脾細胞凋亡的影響.10.分別提取給藥組和空白組小鼠的總RNA,通過RT-PCR方法半定量檢測八珍湯對IL-1mRNA、IL-2mRNA、IL-3mRNA生成的影響.11.通過病理切片,鏡下觀察骨髓細胞的形態(tài)變化,并計算造血組織容量、脂肪組織容量、血竇容量和巨核