nrhTNFα對(duì)小鼠骨髓造血功能的影響.pdf

1、本文研究了不同劑量新型基因工程人腫瘤壞死因子a(nrhTNFa)對(duì)小鼠骨髓造血功能的影響及與化療藥物的協(xié)同作用，探討其毒性作用機(jī)理，為臨床用藥提供理論依據(jù)。 方法：nrhTNFa低劑量(125萬U/kg)、nrhTNFa中劑量(500萬U/kg)、nrhTNFa高劑量(2000萬U/kg)肌肉內(nèi)注射，測(cè)定小鼠骨髓有核細(xì)胞(bonemarrownucleatedcells,BMNCs)計(jì)數(shù)、外周血白細(xì)胞(whitebloodcel

2、ls，WBCs)計(jì)數(shù)、血小板(platelets，PLTs)計(jì)數(shù)、血紅蛋白(HB)含量，瑞氏染色后觀察小鼠骨髓增生程度，并用流式細(xì)胞儀、瓊脂糖凝膠電泳、電鏡檢測(cè)小鼠骨髓細(xì)胞凋亡，用流式細(xì)胞儀分析小鼠骨髓細(xì)胞增殖周期變化。 結(jié)果：1、對(duì)外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)及骨髓增生的影響：低劑量nrhTNFα組小鼠BMNCs和外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)無明顯變化；中劑量nrhTNFα輕度減少BMNCs計(jì)數(shù)，但不影響外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)；高劑量nrhTNFa可使小鼠BMN

3、Cs計(jì)數(shù)、WBCs計(jì)數(shù)和HB含量減少，但對(duì)PLTs計(jì)數(shù)無明顯影響；nrhTNFa3種劑量與環(huán)磷酰胺(CTX)聯(lián)合應(yīng)用不影響CTX減少BMNCs計(jì)數(shù)和外周血細(xì)胞計(jì)數(shù)的作用。低、中劑量nrhTNFa不影響小鼠骨髓增生程度；高劑量nrhTNFa可抑制小鼠骨髓增生，但抑制作用明顯輕于環(huán)磷酰胺(CTX)，3種劑量nrhTNFa與CTX聯(lián)合應(yīng)用時(shí)小鼠骨髓增生程度與單用CTX基本一致，說明nrhTNFa對(duì)CTX引起的骨髓抑制無協(xié)同作用。 2、

4、誘導(dǎo)骨髓細(xì)胞凋亡的作用：(1)電鏡觀察可見高劑量nrhTNFa組小鼠骨髓細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞早期凋亡的特征。(2)流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示低、中、高劑量nrhTNFa組小鼠骨髓細(xì)胞的凋亡率分別為1.2％、2.4％、16.2％，正常對(duì)照組小鼠骨髓細(xì)胞的凋亡率為0.5％。(3)瓊脂糖凝膠電泳顯示出中、高劑量nrhTNFa組小鼠骨髓細(xì)胞DNA呈階梯狀分布的電泳條帶。這些指標(biāo)證明高劑量nrhTNFα有誘導(dǎo)骨髓細(xì)胞凋亡的作用，中劑量nrhTNFα可能有誘導(dǎo)

5、骨髓細(xì)胞凋亡的作用，而低劑量nrhTNFα無凋亡誘導(dǎo)作用。 3、對(duì)骨髓細(xì)胞周期的影響：高劑量nrhTNFa作用于小鼠骨髓細(xì)胞后，細(xì)胞周期中G2/M期細(xì)胞增多，G0/G1期和S期細(xì)胞減少，說明高劑量nrhTNFα可作用于細(xì)胞有絲分裂期，抑制骨髓細(xì)胞的有絲分裂，而低、中劑量組小鼠骨髓細(xì)胞周期無明顯變化。 結(jié)論：1.低劑量nrhTNFa對(duì)小鼠骨髓造血功能無抑制作用。2.中劑量nrhTNFa對(duì)小鼠骨髓造血功能有輕微抑制作用。3.