消癰生肌法治療大鼠乙酸型胃潰瘍的實驗研究.pdf

1、胃潰瘍是臨床常見的消化系統(tǒng)疾病，屬于中醫(yī)學(xué)“胃脘痛”、“痞滿”等范疇。其臨床表現(xiàn)多為胃脘痛伴痞悶脹滿、反酸、惡心、嘔吐等癥，且容易并發(fā)出血、穿孔、梗阻和癌變，危害人類健康。該病的短期治愈已不成問題，但愈后復(fù)發(fā)仍是醫(yī)學(xué)界難題。中藥消癰生肌法應(yīng)用于臨床治療胃潰瘍療效好，復(fù)發(fā)率低。
　　 目的：
　　 本課題旨在探討消癰生肌法中藥對乙酸誘發(fā)大鼠胃潰瘍的治療療效機理。該中藥使用是以“毒熱”病因說為立法依據(jù)、將治療外科癰瘍的“消、

2、托、補”法用于內(nèi)科病治療的創(chuàng)新運用。本實驗是在前人系列研究的基礎(chǔ)上，運用組織切片HE染色法、比色法、ELISA法，通過對胃潰瘍大鼠治療后在病理組織學(xué)、分子生物學(xué)、血清學(xué)等方面的對比研究，來探索消癰生肌法中藥對胃潰瘍，并防止其復(fù)發(fā)的治療作用機制，以此來反證胃潰瘍發(fā)病的“毒熱”病因說。
　　 材料與方法：
　　 1.實驗動物分組治療：SPF級SD大鼠70只，均為雄性，體重（200±10）g。用隨機抽簽法將大鼠分為7組，即正常

3、對照組（正常組）、假手術(shù)對照組（假手術(shù)組）、模型對照組（模型組）、消癰潰得康組（潰得康組）、消癰生肌法中藥湯劑組（湯藥組）、潰瘍膠囊組（膠囊組）、奧美拉唑組（奧美組），每組10只。
　　 2.制作乙酸誘發(fā)大鼠胃潰瘍模型：將傳統(tǒng)的冰乙酸燒灼法加以改良，制備大鼠胃潰瘍模型。普通人按體重60kg計算，人與200g體重大鼠折算比為6.25:1，計算出每種藥物的對應(yīng)濃度：消癰生肌方1.28g/kg，消癰潰得康0.2 g/kg，潰瘍膠囊0.

4、018 g/kg，奧美拉唑腸溶片0.2 mg/kg。
　　 3.實驗方法：各組實驗大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)兩天后開始實驗。禁食24小時后開始造模，造模后第2天開始灌胃給藥，早晚各一次，共12天。正常組，正常飼養(yǎng)，不進行灌胃；假手術(shù)組、模型組，每日灌胃蒸餾水2ml，早晚各一次；湯藥組，每日灌胃消癰生肌方中藥湯劑2ml，早晚各一次；潰得康組，每日灌胃消癰潰得康溶液2ml，早晚各一次；膠囊組，每日灌胃潰瘍膠囊溶液2ml，早晚各一次；奧美組，每日

5、早晨灌胃奧美拉唑腸溶片溶液2ml，晚上灌胃蒸餾水2ml。
　　 灌胃結(jié)束后麻醉下斷頭處死，開腹，找到胃，在幽門、賁門兩端剪斷，將胃取出；沿胃大彎剪開，用生理鹽水清洗，在潔凈工作臺將胃壁展平，觀察潰瘍情況，然后沿潰瘍邊緣3mm切下胃壁，制作病理切片，冰凍待檢。腹主動脈取血約5ml，加入抑肽酶，離心，取上部血清，裝入EP管中，按組別1-70編號標記，冷凍備用。消癰生肌法治療大鼠乙酸型胃潰瘍的實驗研究
　　 4.胃潰瘍的組織學(xué)

6、評價指標：將胃潰瘍病灶或潰瘍疤痕及其周圍組織按照常規(guī)用甲醛固定，石蠟包埋和連續(xù)切片，進行HE染色，運用光學(xué)顯微鏡觀察病理組織變化，測量再生粘膜厚度。
　　 5.血清SOD含量測定：購置血清超氧化物歧化酶（SOD）試劑盒，按使用說明用比色法測定血清SOD含量。
　　 6.血清前列環(huán)素（PGI2）、血栓素（TXA2）的檢測：購置血清PGI2、TXA2試劑盒，按使用說明運用ELISA法檢測PGI2及TXA2含量。
　　

7、 7.血清轉(zhuǎn)移趨化生長因子（TGF）的檢測：購置血清TGF試劑盒，按使用說明運用ELISA法檢測TGF水平。
　　 8.所用藥物與試劑：消癰生肌法中藥湯劑，消癰潰得康顆粒劑，潰瘍膠囊，奧美拉唑鎂腸溶片。100％冰乙酸，10％水合氯醛溶液，10％甲醛溶液，SOD試劑盒，PGI2、TXA2酶聯(lián)免疫試劑盒；TGF酶聯(lián)免疫試劑盒；抑肽酶；100％乙醇。
　　 9.實驗儀器：TDL-5A臺式離心機，LeicaRM2135切片機，0

8、1ympus光學(xué)顯微鏡，SN-682型放射免疫r計數(shù)器，DU-600蛋白核酸分析儀，電熱恒溫水溫箱，恒溫震蕩器，721B分光光度計，INFINITE M200酶標儀；游標卡尺。
　　 結(jié)果：
　　 1、本實驗結(jié)果顯示，各組大鼠病理損傷最重為模型組，表現(xiàn)為粘膜不連續(xù)，潰瘍深者可及肌層及漿膜層，表面有壞死組織；最輕為湯藥組，可見再生的粘膜、肉芽組織及瘢痕組織。
　　 2、各組大鼠再生粘膜厚度由厚到薄為正常組、湯藥治療

9、組、假手術(shù)組、潰得康組、奧美組、膠囊組、模型組。其中，模型組與其它各組比較差異顯著（P<0.05）；湯藥組與模型組、與膠囊組、與奧美組比較差異顯著（P<0.05）；潰得康組與模型組、與膠囊組比較差異顯著（P<0.05），與奧美組比較差異不顯著（P>0.05）。
　　 3、各組大鼠血清SOD含量由高到低為湯藥組、潰得康組、奧美組、假手術(shù)組、正常組、膠囊組、模型組。其中，模型組與其它各組比較差異顯著（P<0.05）；湯藥組與模型組、

10、與膠囊組、與奧美組比較差異顯著（P<0.05）；潰得康組與膠囊組、比較差異顯著（P<0.05）：與奧美組比較差異不顯著（P>0.05）。
　　 4、模型組PGI2含量最低，各組大鼠PGI2由大到小為湯藥組、奧美組、潰得康組、假手術(shù)組、膠囊組、正常組、模型組。其中，模型組與其它各組比較差異顯著（P<0.05）；湯藥組中PGI2含量高于正常組、假手術(shù)組，與之比較有非常顯著性差異（P<0.01）；湯藥組與模型組、潰得康組、與膠囊組、與

11、奧美組比較差異顯著（P<0.05）；潰得康組與模型組比較差異顯著（P<0.05），與膠曩組、與奧美組比較差異不顯著（P>0.05）。
　　 5、模型組TXA2含量最高，各組大鼠TXA2由小到大為正常組、假手術(shù)組、湯藥組、潰得康組、膠囊組、奧美組、模型組。其中，模型組與其它各組比較均有顯著性差異（P<0.05）；湯藥組與模型組、與膠囊組、與奧美組比較差異顯著（P<0.05）；與潰得康組組比較差異不顯著（P>0.05）；潰得康組與模

12、型組比較差異顯著（P<0.05），與膠囊組、與奧美組比較差異不顯著（P>0.05）。
　　 6、模型組PGI2/TXA2比值最低，各組大鼠PGI2/TXA2由大到小為正常組、湯藥組、假手術(shù)組、潰得康組、膠囊組、奧美組、模型組。其中，模型組與其它各組比較差異顯著（P<0.05）；湯藥組與模型組、與潰得康組、與膠囊組、與奧美組比較差異顯著（P<0.05）；潰得康組與膠囊組比較差異顯著（P<0.05），與奧美組比較差異不顯著（P>0.

13、05）。
　　 7、模型組TGF含量最低，各組大鼠TGF由大到小為湯藥組、潰得康組、奧美組、正常組、假手術(shù)組、膠囊組、模型組。其中，模型組與其它各組比較差異顯著（P<0.05）；湯藥組與模型組、與膠囊組、與奧美組比較差異顯著（P<0.05）；與潰得康組比較差異不顯著（P>0.05）；潰得康組與模型組比較差異顯著（P<0.05），與膠囊組、奧美組比較差異不顯著（P>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1、消癰生肌法中

14、藥能促進實驗性大鼠胃粘膜表面壞死組織吸收，加快上皮細胞增殖，使肉芽組織迅速生成，增加再生粘膜厚度，提高愈合的組織學(xué)成熟度，促進潰瘍愈合，防止其復(fù)發(fā)。
　　 2、消癰生肌法中藥能增加血清SOD含量，減少自由基損傷。由此我們認為消癰生肌法中藥具有胃粘膜保護作用。
　　 3、消癰生肌法中藥能通過降低大鼠血清中TXA2水平、提高大鼠血清中PGI2水平，緩解炎癥介質(zhì)釋放、降低炎癥反應(yīng)、減少局部血管痙攣、增強胃粘膜的防御功能，提高愈

15、合的功能成熟度，以此來促進潰瘍的愈合，防止其復(fù)發(fā)。
　　 4、消癰生肌法中藥能有效增強TGF活性，使之接近正常水平，維護胃黏膜的完整性和防御功能，提高愈合的功能成熟度，從而達到促進潰瘍愈合防止其復(fù)發(fā)的目的。
　　 5、我們認為消癰生肌法能提高潰瘍愈合質(zhì)量，是一種療效確切的治療實驗性胃潰瘍的方法，并且有望在抗?jié)儚?fù)發(fā)方面取得一定突破。
　　 6、胃潰瘍的發(fā)病是以“毒熱”為發(fā)病原因之一，以外科治療癰瘍的“消、托、補法