維胃方對乙酸致大鼠胃潰瘍的治療作用及與血漿NT相關(guān)性研究.pdf

1、課題背景： 消化性潰瘍病是消化系統(tǒng)中常見的疾病，呈世界性分布，約有5％～10％的人一生中患過此病，其發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，多為胃、十二指腸黏膜攻擊因子和黏膜自身防御一修復(fù)因子之間失衡所致。其臨床特點(diǎn)為病程長，易復(fù)發(fā)，且常伴發(fā)一些嚴(yán)重的并發(fā)癥。 臨床治療GU主要采用抑制胃酸和胃黏膜保護(hù)劑。目前H2受體阻滯劑及質(zhì)子泵抑制劑在臨床上廣泛應(yīng)用，這兩種藥物的使用，使GU的愈合率顯著提高，但由于費(fèi)用、副作用、耐藥性、患者依從性等問題的存

2、在，最終使該病的復(fù)發(fā)率仍居高不下。因此，研究GU理想的治療方案仍是一件急迫而重要的任務(wù)，近幾年來人們對于GU藥物的開發(fā)，常從天然藥物尋找突破口。 維胃方是導(dǎo)師的經(jīng)驗(yàn)方，通過臨床實(shí)踐證明對GU有較好療效，七及方是維胃方中的組成部分。本實(shí)驗(yàn)采用適合藥物療效觀察的乙酸致大鼠GU模型，以中醫(yī)藥基礎(chǔ)理論為指導(dǎo)，臨床療效為依據(jù)，通過GU的大體愈合情況、潰瘍面積、GU周圍黏膜病理組織切片光學(xué)顯微鏡下觀察，從不同層次闡述維胃方治療GU的效果。并

3、檢測胃液PH值、測定血清Gas、血漿NT水平，其中以整體性調(diào)節(jié)作為切入點(diǎn)，選用NT作為主要指標(biāo)，旨在闡述維胃方治療GU的相關(guān)機(jī)制，為維胃方的臨床運(yùn)用和開發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 實(shí)驗(yàn)方法： 1、制備冰醋酸致大鼠GU模型參照Takagi等乙酸致大鼠GU造模方法，并加以改造。大鼠造模前24h，禁食不禁水。經(jīng)腹腔注射10％水合氯醛溶液，按3.5ml/kg注射麻醉大鼠。腹部剃毛、消毒，于劍突下腹中線打開腹腔，手術(shù)切口長約2cm，暴露出胃

4、，在胃前壁漿膜面接近竇體交界處的胃竇同一部分(避開血管)用浸有100％乙酸，直徑為5mm的圓形濾紙接觸60s，然后還納胃體，逐層縫合切口，酒精消毒，保護(hù)切口。 2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組和相關(guān)指標(biāo)檢測雄性SPF級wistar大鼠72只，根據(jù)完全隨機(jī)法分為9組，每組8只：A正常組，系非造模大鼠，自由飲水，進(jìn)食。B模型組，乙酸致大鼠GU，自由飲水，進(jìn)食。C自愈組，乙酸致大鼠GU，自由飲水，進(jìn)食。D雷尼替丁組，乙酸致大鼠GU，第4天開始灌胃雷尼

5、替丁水懸液2ml.，共7天，每天1次。E1維胃方低劑量組，乙酸致大鼠GU，第4天灌胃低劑量維胃方2ml，共7天，每天1次；E2維胃方中劑量組，乙酸致大鼠GU，第4天開始灌胃中劑量維胃方2ml，共7天，每天1次；E3維胃方高劑量組，乙酸致大鼠GU，第4天，灌胃高劑量維胃方2ml，共7天，每天1次。F1七及方中劑量組，乙酸致大鼠GU，第4天開始灌胃中劑量七及方2ml，共7天，每天1次；F2七及方高劑量組，乙酸致大鼠胃潰瘍，第4天，灌胃高劑量

6、七及方2ml，共7天，每天1次。除模型組在第4天，其余各組均在第11天麻醉后取材，并觀察胃潰瘍的大體愈合情況，檢測胃液PH值、潰瘍面積，光學(xué)顯微鏡下觀察胃潰瘍周圍黏膜病理組織切片，測定血清Gas、血漿NT水平。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件分析，數(shù)據(jù)以x±s表示，采用單因素方差分析方法(One-Way-ANOVA)進(jìn)行多樣本均數(shù)比較。大鼠潰瘍面積的比較，方差不齊，采用Welch檢驗(yàn)，各組間存在差異，采用Durinett'

7、sT3法檢驗(yàn)；大鼠胃液pH值的比較，方差齊，各組間存在差異，采用LSD檢驗(yàn)；大鼠血清Gas水平的比較，方差齊，但各組差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，無需做兩兩比較：大鼠血漿NT水平的比較，方差不齊，采用Welch檢驗(yàn)，各組間存在差異，采用DlJnnett'sT3. 6、大鼠血漿NT水平的比較 方差不齊，采用Welch檢驗(yàn)，各組間存在差異，采用Dunnett'sT3檢驗(yàn)，模型組、雷尼替丁組、維胃方低劑量組、七及方中劑量組與自愈組相比差別

8、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.021，P=0.020，P=0.032，P=0.016)。自愈組、維胃方高劑量組與模型組相比差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.021，P=0.003)。各組與正常組相比差別均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，其中維胃方中劑量組接近正常組(P=1)。各組大體可以分為三個(gè)層次：NT值處于較低水平的是模型組、雷尼替丁組、維胃方低劑量組、七及方中劑量組，NT值處于中等水平的是正常組、維胃方中劑量組、七及方高劑量組，NT值處于較高水平

9、的是自愈組、維胃方高劑量組。維胃方對血漿NT水平的影響呈量效正相關(guān)(r=1，P=0.002)。 結(jié)論： 1、從潰瘍面積中看，造模成功率高達(dá)到100％，自愈組大鼠對GU的自愈效果差，用藥組起到一定治療作用，維胃方中劑量組的療效最佳。 2、維胃方和七及方由于配伍及劑量的關(guān)系出現(xiàn)了復(fù)雜的量效關(guān)系，說明在相同煎煮等技術(shù)條件下，中藥配伍、劑量對療效影響極為重要。 3、從胃黏模大體標(biāo)本觀察中發(fā)現(xiàn)，在用藥各組中維胃方中

10、劑量組效果最好。 4、光學(xué)顯微高倍鏡下觀察胃黏膜病理組織切片，維胃方中劑量組效果最佳，部分機(jī)制是通過改善微循環(huán)、抗炎和細(xì)胞再生這些方面發(fā)揮作用。 5、模型組血漿NT水平低于正常組，說明潰瘍形成時(shí)，體內(nèi)合成和釋放NT明顯減少。 6、模型組胃液pH值高于正常組，表明手術(shù)造模對動(dòng)物本身就是一種應(yīng)激，為防止乙酸的損害作用，大鼠機(jī)體應(yīng)激性的調(diào)動(dòng)體內(nèi)的平衡機(jī)制，迅速中和酸性，以保護(hù)其受損傷的胃黏膜，這可能是模型組胃液pH值升

11、高的原因。 7、維胃方各劑量組血漿NT存在一種劑量依賴的正相關(guān)關(guān)系(r=1，P=0.002)，但是血清Gas并不成量效依賴關(guān)系，說明在脫離乙酸致大鼠GU的手術(shù)應(yīng)激后的治療過程中，推測NT對胃黏膜的影響不是直接通過G細(xì)胞分泌Gas而發(fā)揮作用，很可能是通過合成生長抑素等。 8、根據(jù)pH的統(tǒng)計(jì)結(jié)果，七及方各組pH值高于維胃方各組，說明三七、白及二者單獨(dú)合用，在提高pH值，抗胃酸方面能夠起著重要作用。七及方中劑量組和維胃方低劑量

12、組NT處于同等水平，但低于正常水平時(shí)，七及方中劑量組因?yàn)閜H值高于維胃方低劑量組，所以能夠發(fā)揮更好的療效。 9、維胃方中劑量組在胃液pH值、血清Gas、血漿NT水平均接近正常組，從GU病理組織切片上看，維胃方中劑量組修復(fù)受損胃黏膜效果更強(qiáng)，部分機(jī)制可能是通過NT的神經(jīng)機(jī)制，從抗炎、改善微循環(huán)、細(xì)胞再生等方面，對機(jī)體起著整體性調(diào)節(jié)，發(fā)揮其整體治療GU的作用。 10、維胃方中劑量組血漿NT水平接近正常組(P=1)，推測血漿N